臨床生物化學(xué):第二節(jié)　常見的腫瘤標(biāo)志物及其應(yīng)用評(píng)價(jià)

腫瘤標(biāo)志物經(jīng)過一百多年的發(fā)展歷史，盡管至今為止，具有明確診斷作用的標(biāo)志物不是很多，但有不少標(biāo)志物經(jīng)過臨床實(shí)踐已被大家熟悉和應(yīng)用。

一、腫瘤胚胎性抗原標(biāo)志物

在人類發(fā)育過程中，許多原本只在胎盤期才具有蛋白類物質(zhì)，應(yīng)隨胎兒的出生而逐漸停止合成和分泌，但因某種因素的影響，特別是腫瘤狀態(tài)時(shí)，會(huì)使得機(jī)體一些“關(guān)閉”的基因激活，出現(xiàn)了返祖現(xiàn)象，而重新開啟并重新生成和分泌這些胚胎、胎兒期的蛋白（表8-3)。

表8-3 胚胎類腫瘤標(biāo)志物

這類蛋白雖然與腫瘤組織不一定都具有特定的相關(guān)性，但與腫瘤的發(fā)生存在著內(nèi)在的聯(lián)系，故被作為一種較為常見的腫瘤標(biāo)志物。

（一)癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA)

癌胚抗原是1965年Gold和Freedman首先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的，CEA是一種分子量為22ku的多糖蛋白復(fù)合物，45％為蛋白質(zhì)。CEA的編碼基因位于19號(hào)染色體。一般情況下，CEA是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝的細(xì)胞所合成，通常在妊娠前6個(gè)月內(nèi)CEA含量增高，出生后血清中含量已很低下，健康成年人血清中CEA濃度小于2.5μg/L。

CEA屬于非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，分泌CEA的腫瘤大多位于空腔臟器，如胃腸道、呼吸道、泌尿道等。正常情況下，CEA經(jīng)胃腸道代謝，而腫瘤狀態(tài)時(shí)的CEA則進(jìn)入血和淋巴循環(huán)，引起血清CEA異常增高，使上述各種腫瘤患者的血清CEA均有增高。在臨床上，當(dāng)CEA大于60μg/L時(shí)，可見于結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和肺癌。CEA值升高，表明有病變殘存或進(jìn)展。如肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清CEA量會(huì)明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤(rùn)，其中約70％為轉(zhuǎn)移性癌。一般來說，手術(shù)切除后6周，CEA水平恢復(fù)正常，否則提示有殘存腫瘤，若CEA濃度持續(xù)不斷升高，或其數(shù)值超過正常5-6倍者均提示預(yù)后不良。連續(xù)隨訪定量檢測(cè)血清CEA含量，對(duì)腫瘤病情判斷更具有意義。

有報(bào)道在胃腸道惡性腫瘤患者體內(nèi)存在著CEA的異質(zhì)體，經(jīng)等電聚焦電泳檢測(cè)可顯示8-12個(gè)CEA峰，已知其中三個(gè)峰為癌特異峰，稱CEA-S，其余可能屬于正常的結(jié)腸交叉反應(yīng)抗原簇或致癌過程中的其它過量產(chǎn)物。

除血液之外，其它生物液體，如胰液和膽汁內(nèi)CEA定量可用于診斷胰腺或膽道癌；漿液性滲出液的CEA定量可作為細(xì)胞學(xué)檢查的輔助手段；尿液CEA定量可作為判斷膀胱癌預(yù)后的參考。血清CEA定量結(jié)合jfsoft.net.cn/yishi/甲狀腺降鈣素測(cè)定，有助于甲狀腺髓樣癌的診斷和復(fù)發(fā)的估計(jì)。

（二)甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP)

甲胎蛋白是1956年Bergstrandh和Czar在人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種專一性的甲種球蛋白。1963年G.I.Abelev首先發(fā)現(xiàn)AFP主要是由胎盤層其次是卵黃囊合成，胃腸道粘膜和腎臟合成較少。1964年Tatarinov發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞癌患者血清中檢測(cè)到AFP。AFP是一種在電場(chǎng)中泳動(dòng)于α-球蛋白區(qū)的單一多聚體肽鏈的糖蛋白，其分子量平均為70ku，含糖4％，AFP的編碼基因位于4號(hào)染色體4q11-12，與血清白蛋白、維生素D結(jié)合蛋白同屬一大家族。近年來已發(fā)現(xiàn)了AFP的異質(zhì)體。妊娠的婦女的血和尿中的AFP含量會(huì)持續(xù)增高，從妊娠6周開始合成，至12-15周達(dá)高峰。胎兒血漿中的AFP值可達(dá)到3mg/ml，隨后即逐漸降低，出生后，AFP合成很快受抑制，其含量降至50μg/L，周歲末嬰兒的濃度接近成人水平，一般健康成人血漿AFP濃度低于25μg/L。

AFP是原發(fā)性肝癌的最靈敏、最特異的腫瘤標(biāo)志，血清AFP測(cè)定結(jié)果大于500μg/L以上，或含量有不斷增高者，更應(yīng)高度警惕。肝癌患者血清AFP含量變化的速率和程度與腫瘤組織分化程度高低有一定相關(guān)性，分化程度較高的腫瘤AFP含量常大于200μg/L。

檢測(cè)AFP的免疫學(xué)方法主要有免疫擴(kuò)散電泳（火箭電泳)、γ-射線計(jì)數(shù)¹²⁵I標(biāo)記檢測(cè)法和定性、定量酶免疫方法。用不同的植物凝集素可以檢測(cè)和鑒別不同組織來源的AFP的異質(zhì)體。如用小扁豆凝集素（LCA)親和交叉免疫電泳自顯影法，可以檢測(cè)LCA結(jié)合型AFP異質(zhì)體。

血清AFP含量的檢測(cè)對(duì)其它腫瘤的監(jiān)測(cè)亦有重要臨床價(jià)值。如睪丸癌、畸胎瘤、胃癌、胰腺癌等患者血清AFP含量可以升高。某些非惡性肝臟病變，如病毒性肝炎、肝硬化，AFP水平亦可升高，故必須通過動(dòng)態(tài)觀察AFP含量和ALT酶活性的變化予以鑒別診斷。

（三)胰胚胎抗原（pancreaticoncofetalantigen，POA)

胰胚胎抗原是1974年Banwo等人自胎兒胰腺抽提出的抗原，1979年被國(guó)際癌癥生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會(huì)正式命名。POA是一種糖蛋白，分子量為40ku，在血清中以分子量900ku復(fù)合形式存在，但可降解為40ku。正常人群血清中RIA法測(cè)定小于7ku/L。

胰腺癌的POA的陽(yáng)性率為95％，其血清含量大于20ku/L，當(dāng)肝癌、大腸癌、胃癌等惡性腫瘤時(shí)也會(huì)使POA升高，但陽(yáng)性率較低。

二、糖類抗原標(biāo)志物

腫瘤標(biāo)志物相關(guān)物質(zhì)是指由腫瘤細(xì)胞表面的抗原物質(zhì)或者是腫瘤細(xì)胞所分泌的物質(zhì)，這類物質(zhì)又是單克隆抗體，故又稱為糖類抗原（carbohydrateantigen，CA)。這類標(biāo)志物出現(xiàn)為臨床腫瘤的診斷帶來方便，糖類抗原標(biāo)志物產(chǎn)生又可分為兩大類，為高分子粘蛋白類（表8-4)和血型類抗原（表8-5)。

表8-4 糖類高分子粘蛋白抗原腫瘤標(biāo)志物

表8-5　血型類抗原腫瘤標(biāo)志物

這類抗原標(biāo)志物的命名是沒有規(guī)律的，有些是腫瘤細(xì)胞株的編號(hào)，有些是抗體的物質(zhì)編號(hào)，常用檢測(cè)方法是單克隆抗體法，有的還同時(shí)用兩種不同位點(diǎn)的單抗做成雙位點(diǎn)固相酶免疫法，這些比一般化學(xué)法測(cè)定的特異性有很大的提高。而對(duì)一些糖類抗原的異質(zhì)體，則通常用不同的植物凝集素來進(jìn)行分離檢測(cè)。

（一)CA125

1983年由Bast等從上皮性卵巢癌抗原檢測(cè)出可被單克隆抗體OC125結(jié)合的一種糖蛋白。分子量為200ku，加熱至100℃時(shí)CA125的活性破壞，正常人血清CA125中的（RIA)陽(yáng)性臨界值為35ku/L。

CA125是上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的標(biāo)志物，漿液性子宮內(nèi)膜樣癌、透明細(xì)胞癌、輸卵管癌及未分化卵巢癌患者的CA125含量可明顯升高。當(dāng)卵巢癌復(fù)發(fā)時(shí)，在臨床確診前幾個(gè)月便可呈現(xiàn)CA125增高，尤其卵巢癌轉(zhuǎn)移患者的血清CA125更明顯高于正常參考值。CA125測(cè)定和盆腔檢查的結(jié)合可提高試驗(yàn)的特異性。動(dòng)態(tài)觀察血清CA125濃度有助于卵巢癌的預(yù)后評(píng)價(jià)和治療控制，經(jīng)治療后，CA125含量可明顯下降，若不能恢復(fù)至正常范圍，應(yīng)考慮有殘存腫瘤的可能。95％的殘存腫瘤患者的血清CA125濃度大于35kU/L。然而，CA125血清濃度輕微上升還見于1％健康婦女，3％-6％良性卵巢疾患或非腫瘤患者，包括孕期起始3個(gè)月、行經(jīng)期、子宮內(nèi)膜異位、子宮纖維變性、急性輸卵管炎、肝病、胸腹膜和心包感染等。

（二)CA15-3

CA15-3是1984年Hilkens等從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成的小鼠單克隆抗體（115-DB)；1984年Kufu等自肝轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞膜制成單克隆抗體（DF-3)，故被命名為CA15-3。CA15-3分子量為400ku，分子結(jié)構(gòu)尚未清楚。正常健康者血清CA15-3含量（RIA法)小于28kU/L。

30％-50％是乳腺癌患者的CA15-3明顯升高，它也是監(jiān)測(cè)乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳指標(biāo)，當(dāng)CA15-3大于100kU/L時(shí)，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變，其含量的變化與治療結(jié)果密切相關(guān)。肺癌、胃腸癌、卵巢癌及宮頸癌患者的血清CA15-3也可升高，應(yīng)予以鑒別，特別要排除部分妊娠引起的含量升高。

（三)CA19-9

CA19-9是1979年Koprowski等用結(jié)腸癌細(xì)胞免疫小鼠，并與骨髓瘤雜交所得116NS19-9單克隆抗體，它是一種分子量為5000ku的低聚糖類腫瘤相關(guān)糖類抗原，其結(jié)構(gòu)為L(zhǎng)e^a血型抗原物質(zhì)與唾液酸Le^xa的結(jié)合物。正常人群的CA19-9血清含量為（RIA法)2-16kU/L。

CA19-9是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物。血清CA19-9陽(yáng)性的臨界值為37kU/L。胰腺癌患者85％-95％為陽(yáng)性。當(dāng)CA19-9小于1000kU/L時(shí)，有一定的手術(shù)意義，腫瘤切除后CA19-9濃度會(huì)下降，如再上升，則可表示復(fù)發(fā)。結(jié)直腸癌、膽囊癌、膽管癌、肝癌和胃癌的陽(yáng)性率也會(huì)很高，若同時(shí)檢測(cè)CEA和AFP可進(jìn)一步提高陽(yáng)性檢測(cè)率。良性疾患時(shí)如胰腺炎和黃疸，CA19-9濃度也可增高，但往往呈“一過性”，而且其濃度多低于120kU/L，必須加以鑒別。

（四)CA50

CA50是1983年Lindholm等從抗人結(jié)、直腸癌Colo-205細(xì)胞株的一系列單克隆抗體中篩選出的一株對(duì)結(jié)、直腸癌有強(qiáng)烈反應(yīng)，但不與骨髓瘤細(xì)胞及血淋巴細(xì)胞反應(yīng)的單克隆抗體，所能識(shí)別的抗原稱CA50。Ca50存在于細(xì)胞膜內(nèi)，其抗原決定簇為唾液酸Le^a血型物質(zhì)與唾液酸-N-四氧神經(jīng)酰胺。在正常人群，CA50血清濃度（RIA法)小于20kU/L。

一般認(rèn)為，CA50是胰腺和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物，因CA50廣泛存在胰腺、膽囊、肝、胃、結(jié)直腸、膀胱、子宮，當(dāng)細(xì)胞惡變時(shí)，由于糖基轉(zhuǎn)化酶的失活或胚胎期才能活躍的某些轉(zhuǎn)化酶被激活，造成細(xì)胞表面糖類結(jié)構(gòu)性質(zhì)改變而形成CA50，因此，它又是一種普遍的腫瘤標(biāo)志相關(guān)抗原，而不是特指某個(gè)器官的腫瘤標(biāo)志物。所以在多種惡性腫瘤中可檢出不同的陽(yáng)性率。1983年，建立了放射免疫分析法，1987年應(yīng)用CA50單抗，在國(guó)內(nèi)建立了IRMA技術(shù)用于腫瘤的早期診斷，胰腺癌、膽囊癌的陽(yáng)性檢測(cè)率達(dá)90％，對(duì)肝癌、胃癌、結(jié)直腸癌及卵巢腫瘤診斷亦有較高價(jià)值，在胰腺炎、結(jié)腸炎和肺炎發(fā)病時(shí)，CA50也會(huì)升高，但隨炎癥消除而下降。

三、酶類標(biāo)志物

酶及同工酶是最早出現(xiàn)和使用的腫瘤標(biāo)志物之一（表8-6)。腫瘤狀態(tài)時(shí)，機(jī)體的酶活力就會(huì)發(fā)生較大變化，這是因?yàn)椋孩倌[瘤細(xì)胞或組織本身誘導(dǎo)其它細(xì)胞和組織產(chǎn)生異常含量的酶；②腫瘤細(xì)胞的代謝旺盛，細(xì)胞通透性增加，使得腫瘤細(xì)胞內(nèi)的酶進(jìn)入血液，或因腫瘤使得某些器官功能不良，導(dǎo)致各種酶的滅活和排泄障礙；③腫瘤組織壓迫某些空腔而使某些通過這些空腔排出的酶返流回血液。

在腫瘤標(biāo)志酶中根據(jù)來源可將其分為兩類：①組織特異性酶，因組織損傷或變化而使儲(chǔ)存在細(xì)胞中的酶釋放，如前列腺特異性抗原等；②非組織特異性酶，主要是腫瘤細(xì)胞代謝加強(qiáng)，

表8-6 酶類腫瘤標(biāo)志物

特別是無氧酵解增強(qiáng)，大量酶釋放到血液中，如已糖激酶等。

在酶標(biāo)志物分析中，同工酶的分辨和檢出是提高標(biāo)志物臨床應(yīng)用的重要的環(huán)節(jié)，從目前所知的腫瘤標(biāo)志同工酶可分為三大類型：①異位型同工酶：指某種瘤組織改變了自己的分泌特性，而去分泌表達(dá)了其它成年組織的同工酶的類型；②胚胎型同工酶，某些組織在腫瘤狀態(tài)時(shí)，使酶的同工酶譜退化到胚胎時(shí)未分化狀態(tài)，而分泌出大量的胚胎期的同工酶，這種變化往往與腫瘤的惡性程度成正比；③胎盤型同工酶，有些腫瘤組織會(huì)分泌出某些原屬胎盤階段的同工酶譜。從目前的資料分析，這類胎盤型同工酶已達(dá)20余種。酶的活性變化常常與組織器官的損傷有密切關(guān)系。在機(jī)體中，能造成酶活性變化的因素太復(fù)雜，從而使在診斷腫瘤時(shí)特異性受到很大影響。

（一)前列腺特異性抗原（prostatespecificantigen，PSA)

1971年，Hara等首先發(fā)現(xiàn)PSA是由前列腺上皮細(xì)胞合成分泌至精液中，是精漿的主要成分之一；1979由Wang等從前列腺肥大癥患者的前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶，分子量34ku，編碼基因定位于19q13，PSA僅存在于前列腺上皮細(xì)胞的胞質(zhì)、導(dǎo)管上皮和粘液內(nèi)，具有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性，PSA在正常男性（RIA法、ElA法)含量小于2.5μg/L。

PSA是前列腺癌的特異性標(biāo)志物，也是目前少數(shù)器官特異性腫瘤標(biāo)志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，血清PSA定量的陽(yáng)性臨界值為大于10μg/L，前列腺癌的診斷特異性達(dá)90％-97％。

血清PSA除了作為檢測(cè)和早期發(fā)現(xiàn)前列腺癌，還可用于治療后的監(jiān)控，90%術(shù)后患者的血清PSA值可降至不能檢出的痕量水平，若術(shù)后血清PSA值升高，提示有殘存腫瘤。放療后療效顯著者，50％以上患者在2個(gè)月內(nèi)血清PSA降至正常。

（二)α-L巖藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU)

1980年由Deugnier等首先在3例原發(fā)性肝癌患者血清中發(fā)現(xiàn)AFU活性升高。AFU是存在于血清中的一種溶酶體酸性水解酶，分子量230ku，單個(gè)亞基分子量50ku。AFU正常參考值（化學(xué)法)為324±90μmol/L。

AFU是原發(fā)性肝癌的一種新的診斷標(biāo)志物，廣泛分布于人體組織細(xì)胞、血液和體液中，參與體內(nèi)糖蛋白、糖脂和寡糖的代謝。原發(fā)性肝癌患者血清AFU活力顯著高于其它各類疾患（包括良、惡性腫瘤)。雖然AFU升高的機(jī)制不甚明了，但可能有以下幾種：①肝細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的壞死使溶酶體大量釋放入血；②正常肝細(xì)胞的變性壞死可使攝取和清除糖苷酶的功能下降；③腫瘤細(xì)胞合成糖苷酶的功能亢進(jìn)；④腫瘤細(xì)胞可能分泌某種抑制因子，抑制肝細(xì)胞對(duì)糖苷酶的清除能力或釋放某些刺激因子，促進(jìn)肝細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞本身合成糖苷酶�？傊�，血清AFU活性升高可能是由多種因素綜合作用的結(jié)果，是對(duì)原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌檢測(cè)的又一敏感、特異的新標(biāo)志物。

血清AFU活性動(dòng)態(tài)曲線對(duì)判斷肝癌治療效果、估計(jì)預(yù)后和預(yù)報(bào)復(fù)發(fā)有著極其重要的意義，甚至優(yōu)于AFP。但是，值得提出的是，血清AFU活力測(cè)定在某些轉(zhuǎn)移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢或子宮癌之間有一些重疊，甚至在某些非腫瘤性疾患如肝硬化、慢性肝炎和消化道出血等也有輕度升高，在使用AFU時(shí)應(yīng)與AFP同時(shí)測(cè)定，可提高原發(fā)性肝癌的診斷率，有較好的互補(bǔ)作用。

現(xiàn)發(fā)現(xiàn)AFU在用瓊脂糖凝膠等電聚焦電泳分析時(shí)存在8種不同等電點(diǎn)的同工酶，其范圍在3.5-6.5之間，正常人的AFU同工酶有兩種類型：低峰值型和Ⅳ主峰型。乙型肝炎患者出現(xiàn)3種AFU同工酶譜：Ⅷ主峰型，Ⅳ、Ⅷ雙峰型和Ⅳ主峰、Ⅴ次峰型。原發(fā)性肝癌患者血清AFU同工酶變化復(fù)雜，有5種類型：低峰值型，Ⅳ、Ⅴ雙峰型，Ⅲ、Ⅳ雙峰型，Ⅴ型和Ⅵ型。根據(jù)各自的峰型特點(diǎn)，AFU同工酶對(duì)正常人、肝炎和原發(fā)性肝癌患者的鑒別診斷具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

（三)神經(jīng)原特異性烯醇化酶（neuron-specificenolase，NSE)

烯醇化酶是催化糖原酵途徑中甘油分解的最后的酶。由3個(gè)獨(dú)立的基因片段編碼3種免疫學(xué)性質(zhì)不同的亞基α、β、γ，組成5種形式的同工酶αα、ββ、γγ、αγ、βγ。二聚體是該酶分子的活性形式，γ亞基同工酶存在于神經(jīng)原和神經(jīng)內(nèi)分泌組織，稱為NSE。α亞基同工酶定位于膠質(zhì)細(xì)胞，稱為非神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NNE)。NSE和NNE的分子量分別為78ku和87ku，正常參考范圍為0.6-5.4μg/L。

NSE是神經(jīng)母細(xì)胞瘤和小細(xì)胞肺癌的標(biāo)記物。神經(jīng)母細(xì)胞瘤是常見的兒童腫瘤，占1-14歲兒童腫瘤的8％-10％。NSE作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物，對(duì)該病的早期診斷具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的尿中NSE水平也有一定升高，治療后血清NSE水平降至正常。血清NSF水平的測(cè)定對(duì)于監(jiān)測(cè)療效和預(yù)報(bào)復(fù)發(fā)均具有重要參考價(jià)值，比測(cè)定尿液中兒茶酚胺的代謝物更有意義，小細(xì)胞肺癌（SCLC)是一種惡性程度高的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤，約占肺癌的25％-30％，它可表現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的特性，有過量的NSE表達(dá)，比其它肺癌和正常對(duì)照高5-10倍以上。SCLC患者血清NSE檢出的陽(yáng)性率可高達(dá)65％-100％，目前已公認(rèn)為NSE可作為SCLC高特異性、高靈敏性的腫瘤標(biāo)志物，有報(bào)道，NSE水平與SCLC轉(zhuǎn)移程度相關(guān)，但與轉(zhuǎn)移的部位無關(guān)，NSE水平與其對(duì)治療的反應(yīng)性之間也有一個(gè)良好的相關(guān)性。

四、激素類標(biāo)志物

激素是一類由特異的內(nèi)分泌腺體或散在體內(nèi)的分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的生物活性物質(zhì)，當(dāng)這類具有分泌激素功能的細(xì)胞癌變時(shí)，就會(huì)使所分泌的激素量發(fā)生異常。常稱這類激素為正位激素異常。而異位激素則是指在正常情況下不能生成激素的那些細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞后所產(chǎn)生的激素，或者是那些能產(chǎn)出激素的細(xì)胞癌變后，分泌出的是其它激素細(xì)胞所產(chǎn)生的激素（表8-7)。衡量異位激素的條件是：①有非內(nèi)分泌腺細(xì)胞合成的激素；②某種內(nèi)分泌細(xì)胞卻分泌其他分泌腺細(xì)胞的激素；③腫瘤患者同時(shí)伴有分泌異常綜合征；④這類腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)也能產(chǎn)生激素；⑤腫瘤切除或經(jīng)治療腫瘤消退時(shí)，此種激素含量下降，內(nèi)分泌綜合征的癥狀改善。

表8-7 激素類腫瘤標(biāo)志物

一般來講，異位激素的化學(xué)本質(zhì)與正位激素相似，不同類型的惡性腫瘤可分泌不同種類的異生性激素或分泌出同一種的激素，而同一種腫瘤細(xì)胞可分泌一種或多種不同的異生性激素。這給檢查帶來了難度，常見的可分泌異生性激素的惡性腫瘤是肺未分化小細(xì)胞癌、神經(jīng)外胚層腫瘤及類癌等。根據(jù)腫瘤狀態(tài)、機(jī)體內(nèi)的激素含量的變化，觀察這些激素動(dòng)態(tài)變化，無疑會(huì)給臨床診斷帶來標(biāo)志性的依據(jù)。

（一)降鈣素（calcitonin，CT)

CT是由甲狀腺濾泡細(xì)胞C細(xì)胞合成、分泌的一種單鏈多肽激素，故又稱甲狀腺降鈣素，是由32個(gè)氨基酸組成，分子量3.5ku。CT的前體物是一個(gè)由136個(gè)氨基酸殘基組成大分子無活性激素原，分子量為15ku，可迅速水解成有活性的CT，人類CT的半壽期只有4-12min，正常情況下它的靶器官是骨、腎和小腸，主要作用是抑制破骨細(xì)胞的生長(zhǎng)，促進(jìn)骨鹽沉積，增加尿磷，降低血鈣和血磷。放射免疫測(cè)定為常用方法，正常參考值為小于100ng/L。

目前，甲狀腺髓樣癌患者的CT一定會(huì)升高，因?yàn)榻碘}素的半壽期較短，所以降鈣素可作為觀察臨床療效的標(biāo)志物。

肺癌、乳腺癌、胃腸道癌以及嗜鉻細(xì)胞瘤患者可因高血鈣或異位分泌而使血清CT增加，另外，肝癌和肝硬化患者也偶可出現(xiàn)血清CT增高。

（二)人絨毛膜促性腺激素（humanchorionic gonagotropin，hCG)

hCG是由胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞所分泌的一類糖蛋白類激素，在正常妊娠婦女血中可以測(cè)出hCG。hCG有α、β兩個(gè)亞基，α-亞基的分子量約為13000，α-亞基的生物特性與卵泡刺激素（FSH)和黃體生成激素（LH)的α-亞基相同。β-亞基的分子量約15000，β-亞基為特異性鏈，可被單克隆抗體檢測(cè)，也是一個(gè)較好的標(biāo)志物。在每個(gè)亞基上有兩條N-糖鏈，其中3/4是復(fù)雜型雙天線，1/4是以單天線的形式出現(xiàn)。由此決定了各類hCG激素的生物特性。通常情況下，尿中的hCG的總量（ELISA法)小于30μg/L，血清hCG小于10μg/L，β-hCG小于3.0μg/L。當(dāng)胎盤絨毛膜細(xì)胞惡變?yōu)閻盒?a class="channel_keylink" href="/pharm/2009/20090113045532_89271.shtml" target="_blank">葡萄胎后，hCG會(huì)明顯增高，這時(shí)hCG糖鏈結(jié)構(gòu)有部分轉(zhuǎn)為三天線和四天線的結(jié)構(gòu)。當(dāng)發(fā)生絨毛膜上皮癌后，除有三、四天線外，還出現(xiàn)更為異常的偏二天線的糖鏈結(jié)構(gòu)，而且這些異常糖鏈結(jié)構(gòu)具有與曼陀羅凝集素（DSA)特異的親和力。正常情況下，結(jié)合率為42.3％-72.4％，絨毛膜上皮癌的結(jié)合率為53.5％-87.1％。hCG還會(huì)在乳腺癌、睪丸癌、卵巢癌增高。當(dāng)子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫等非腫瘤狀態(tài)時(shí)，hCG也會(huì)增高。

（三)兒茶酚胺類及其衍生物

兒茶酚胺類激素是以其結(jié)構(gòu)中均含兒茶酚又屬于胺類而得名。正常情況下，它是由腎上腺髓質(zhì)中的一些交感神經(jīng)節(jié)纖維末梢終止髓質(zhì)細(xì)胞（又稱嗜鉻細(xì)胞)產(chǎn)生和分泌，包括腎上腺素（E)、去甲腎上腺素（NE)和多巴胺（DA)等，它們既是激素又是神經(jīng)遞質(zhì)。

⒈變腎上腺素（metanephrine)變腎上腺素是兒茶酚胺的甲氧化代謝產(chǎn)物，由于甲基化是在肝臟內(nèi)微粒體中進(jìn)行，而兒茶酚胺的形成都是在腎上腺髓質(zhì)的嗜鉻細(xì)胞及交感神經(jīng)末梢處形成，所以，從檢測(cè)尿中的變腎上腺素濃度可間接地了解兒茶酚胺的分泌。

目前使用高效液相的紫外檢測(cè)仍是最為有效的方法之一，正常值為0.30-1.50μmol/24h尿。變腎上腺素濃度增高是分泌型嗜鉻細(xì)胞瘤的主要標(biāo)志物，它比兒茶酚胺和香草扁桃酸更穩(wěn)定。

⒉垂草扁桃酸（VMA)香草扁桃酸（3-甲氧-4羥苦杏仁酸，VMA)是腎上腺素和去甲腎上腺素經(jīng)單胺氧化酶（MAO)和兒茶酚胺-0-甲基轉(zhuǎn)移酶（COMT)的作用下，甲基化和脫氨基而產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。VMA主要是從尿中排出。

高效液相電化學(xué)檢測(cè)是常用的方法，正常參考值隨年齡增長(zhǎng)而增加，成人為5.0-35.0μmol/24h尿。

能合成兒茶酚胺類的腎上腺髓質(zhì)的嗜鉻細(xì)胞及交感神經(jīng)細(xì)胞末梢，均源于胚胎期神經(jīng)嵴，這兩種組織含有相同的酶。一旦這類組織增殖，則尿中VMA就會(huì)增高，所以它常被認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)節(jié)瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的標(biāo)志物。

約有70％神經(jīng)母細(xì)胞瘤的患者均有VMA增高，在IV期神經(jīng)瘤患者VMA/HVA的比值可作為預(yù)后評(píng)價(jià)指標(biāo)，在兒童的神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者中，VMA也是一項(xiàng)重要指標(biāo)。

VMA又可作為嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷首選標(biāo)志物，但有時(shí)增高程度不穩(wěn)定，宜同時(shí)測(cè)定尿中兒茶酚胺和變腎上腺素。

⒊高香草酸（HVA)高香草酸（3-甲氧-4-羥苯乙酸，HVA)是多巴胺的主要代謝產(chǎn)物，兒茶酚在肝臟內(nèi)經(jīng)羧化和氨基氧化而成。

常采用高效液相電化學(xué)檢測(cè)方法，正常參考值與VMA相似，也隨年齡增長(zhǎng)而增加，成人為15-40μmol/24h尿。尿中HVA增加與多巴合成量有關(guān)。在神經(jīng)母細(xì)胞瘤、兒童交感神經(jīng)腫瘤時(shí)，常選用HVA作為診斷和隨訪的一種主要的標(biāo)志物。

五、其它蛋白質(zhì)類標(biāo)志物

蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志是最早發(fā)現(xiàn)的標(biāo)志物（表8-8)。在現(xiàn)有的標(biāo)志物中，如β₂微球蛋白、免疫球蛋白。一般來講這類標(biāo)志物特異性稍差，但檢測(cè)方法相對(duì)比較容易，常作常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。

表8-8 蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物

（一)β₂－微球蛋（β₂-microglobulin。β₂m)

β₂m由Berggard和Bearn于1996年從腎臟患者尿中分離出的一種蛋白質(zhì)，由于它的分子量?jī)H為1.2ku，電泳時(shí)顯于β₂m區(qū)帶，故被命名為β₂-微球蛋白。β₂m是人體有核細(xì)胞產(chǎn)生的一種由100個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多肽低分子蛋白。β₂m血中含量（RIA、EIA法)正常參考范圍為3.1±0.96mg/L，尿β₂m為0.31±0.34mg/L；腦脊液β₂m為1.27±0.11mg/L。

β₂m是惡性腫瘤的輔助標(biāo)志物，也是一些腫瘤細(xì)胞上的腫瘤相關(guān)抗原。β₂m是人類白細(xì)胞抗原（HLA)的輕鏈部分，鏈內(nèi)含有一對(duì)二硫鍵，β₂m與HLA-A、B、C抗原的重鏈非共價(jià)地相結(jié)合而存在于細(xì)胞膜上。一般認(rèn)為除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞外，其它細(xì)胞均含有β₂m。因此，起源于人體間質(zhì)細(xì)胞上皮和造血系統(tǒng)的正常細(xì)胞和惡性細(xì)胞均能合成β₂m。它可從有核細(xì)胞中脫落進(jìn)入血循環(huán)，使血液中的β₂m升高。血清β₂m不但可以在腎功能衰竭、多種血液系統(tǒng)疾病及炎癥時(shí)升高，而且在多種疾病中均可增高，故應(yīng)排除由于某些炎癥性疾病或腎小球?yàn)V過功能減低所致的血清β₂m增高。腫瘤患者血清β₂m含量異常增高，在淋巴系統(tǒng)腫瘤如慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴細(xì)胞肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤等中尤為明顯，在肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及子宮頸癌等中也可見增高。由于在腫瘤早期，血清β₂m可明顯高于正常值，故有助于鑒別良、惡性口腔腫瘤。腦脊液中β₂m的檢測(cè)對(duì)腦膜白血病的診斷有特別的意義。

（二)鐵蛋白（ferritin，F(xiàn)er)

鐵蛋白是1884年Schmiedeber所發(fā)現(xiàn)的水溶性鐵貯存蛋白，1937年被Laufberger命名為鐵蛋白，1965年Richter等從惡性腫瘤細(xì)胞株中分離出鐵蛋白，并發(fā)現(xiàn)鐵蛋白存在于各種組織和體液中。鐵蛋白是一種脫鐵蛋白組成的具有大分子（450ku)結(jié)構(gòu)的糖蛋白，由24個(gè)亞單位聚集而成，每個(gè)鐵蛋白分子可貯存4500個(gè)鐵原子。正常血清中含量（RIA法、EIA法)男性為20-250μg/L，女性為10-120μg/L。

鐵蛋白具有兩個(gè)亞基，為肝臟型（L型)和心臟型（H型)，不同比例的亞基聚合而成純聚體和雜合體，可得到不同的同工鐵蛋白圖譜。在腫瘤狀態(tài)時(shí)，酸性同分異構(gòu)體鐵蛋白增高，一般情況下與白血病、肺癌、乳腺癌有關(guān)，當(dāng)肝癌時(shí)，AFP測(cè)定值較低的情況下，可用鐵蛋白測(cè)定值補(bǔ)充，以提高診斷率。在色素沉著、炎癥、肝炎時(shí)鐵蛋白也會(huì)升高。

（三)本周蛋白（Bence-Jonesprotein，BJP)

早在1845年由一位內(nèi)科醫(yī)生jfsoft.net.cn/wsj/兼化學(xué)病理學(xué)家HenryBenceJones首次描述了這種蛋白，它可被氨基水楊酸、三氯醋酸、硝酸和鹽酸沉淀，加熱到45-60℃時(shí)，沉淀又再現(xiàn)，故又名為凝溶蛋白。1963年，Schwary和Edelman對(duì)骨髓瘤球蛋白輕鏈的胰蛋白酶水解產(chǎn)物和同一患者的本周蛋白進(jìn)行比較，結(jié)果表明本周蛋白由完整的輕鏈組成，在大多數(shù)病例中，本周蛋白的沉淀系數(shù)為3.6s，分子量為45000u，屬于游離輕鏈的雙體，當(dāng)沉淀系數(shù)為1.8s時(shí)，分子量為22500u，多屬于單體。

本周蛋白是多發(fā)性骨髓瘤的典型標(biāo)志物，或稱其為“免于球蛋白輕鏈”標(biāo)志物。免疫球蛋白的輕鏈可分為Kappa（κ-Ig)和Lambda（λ-Ig)兩類，然而，一個(gè)克隆的漿細(xì)胞中能產(chǎn)生兩種輕鏈混存于單一抗體分子中。慢性淋巴瘤、骨肉瘤等均會(huì)引起本周蛋白陽(yáng)性，腎病時(shí)也會(huì)陽(yáng)性。目前用于檢測(cè)本周蛋白的方法很多，如：①熱沉淀：此種反應(yīng)易受pH及多種理化因素影響，因此宜用pH4.9醋酸緩沖液調(diào)到恒定環(huán)境；②醋酸纖維薄膜電泳：可用清晨第一次尿，濃縮尿液50倍左右后，進(jìn)行CAM電泳，經(jīng)麗春紅染色，BJP區(qū)帶在α₂-γ區(qū)間可被顯現(xiàn)；③聚丙烯酰胺溶膠電泳：是以聚丙烯酰胺凝膠作支持物的電泳技術(shù)，它是一種不連續(xù)的凝膠電泳，故能使蛋白質(zhì)各組份被清楚地分開，BJP呈現(xiàn)的位置與CAME相同；④非濃縮尿與銀染技術(shù)：由Shate建立的一種不需濃縮尿的銀染技術(shù)，提高了尿中BJP檢測(cè)敏感性；⑤免疫電泳；⑥固定免疫電泳：它作為一種更為靈敏的篩選BJP方法，比一般免疫電泳靈敏度提高近10倍。

六、腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用

用腫瘤標(biāo)志物測(cè)定腫瘤在臨床上已應(yīng)用了許多年，為臨床的診斷和療效觀察起了很多的作用，但在應(yīng)用過程中，確實(shí)也存在著特異性不強(qiáng)、陽(yáng)性率不高等不足。為了提高診斷的陽(yáng)性差，臨床上常將幾項(xiàng)相關(guān)的標(biāo)志物組成聯(lián)合標(biāo)志物組，同時(shí)對(duì)某一腫瘤進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)用多變量分析的方法，提高臨床的診斷的準(zhǔn)確性。

（一)肺癌的診斷的標(biāo)志物

CEA是最早用于肺癌的診斷，特別對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷有一定的意義。目前臨床上常將CEA和總唾液酸蛋白（TSA)聯(lián)合檢測(cè)，可提高診斷的靈敏度和特異性�；駽EA與降鈣素以及ACTH聯(lián)合檢測(cè)能對(duì)治療的效果提供依據(jù)。

在肺癌的基因檢測(cè)中，往往以檢測(cè)P⁵³基因和RB基因的表達(dá)為主。

肺癌的腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用如能結(jié)合細(xì)胞學(xué)的檢查，其價(jià)值就更大。

（二)乳腺癌的診斷的標(biāo)志物

乳腺腫瘤的標(biāo)志物有不少，最早使用的是CEA、hCG、鐵蛋白等。近年來，癌抗原物質(zhì)的出現(xiàn)，特別是CA153、CA549標(biāo)志物的檢查為乳腺腫瘤的診斷帶來一種較為可靠的依據(jù)。在基因檢測(cè)方面，主要有P⁵³、C-erb-2等�，F(xiàn)有學(xué)者認(rèn)為，乳腺腫瘤的患者的家族中存在著一種易感性的基因，這就是BRCA1和BRCA2，這對(duì)早期診斷和發(fā)現(xiàn)乳腺腫瘤有一定的意義。

（三)肝癌的診斷標(biāo)志物

到目前為止，AFP仍然是肝癌診斷的最佳標(biāo)志物，除此之外，還有γ-GT、AFU、GGT-Ⅱ、RNAase同工酶、AKP同工酶、醛縮酶同工酶、β₂-微球蛋白相關(guān)抗原等。在肝癌的檢測(cè)中，以幾項(xiàng)標(biāo)志物協(xié)同使用，能提高診斷陽(yáng)性率。

（四)胰腺癌的診斷標(biāo)志物

胰腺癌的早期診斷比較困難，手術(shù)切除率低，從目前的胰腺癌的診斷標(biāo)志物來看，CA19-9是比較好的診斷標(biāo)志物，其陽(yáng)性值與腫瘤大小有一定的相關(guān)性。CA19-9又可與CA50或與胰腺癌組織抗原一起，作為胰腺癌診斷的聯(lián)合指標(biāo)。

（五)卵巢癌的診斷標(biāo)志物

從目前的卵巢癌的診斷的單個(gè)標(biāo)志物來看，特異性不高。如能將幾個(gè)標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可提高診斷的陽(yáng)性率。

現(xiàn)可組合的標(biāo)志物有：CEA、hCG、SIEX、CA125、CA19-9等單克隆抗體，在基因檢測(cè)方面有K-ras癌基因等。