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臨床常用血清酶同工酶及其亞型分析

臨床常用血清酶同工酶及其亞型分析:臨床上可根據(jù)酶濃度的變化用以輔助診斷。若酶濃度變化由細胞壞死或細胞膜通透性變化引起,表示臟器或組織損傷;若為細胞內(nèi)酶合成增加所致,提示組織再生、修復、成骨或異位分泌,或提示有惡性腫瘤的可能;若為酶排泄障礙引起者說明有梗阻存在。同工酶的分析與醫(yī)學網(wǎng)鑒定則能反應疾病的部位、性質(zhì)和程度。一、轉氨酶及其同工酶(一)生物化學特性轉氨酶或稱氨基轉移酶是一組催化氨基在氨基酸與a-酮酸間轉移的酶類,丙氨酸氨基轉移

臨床上可根據(jù)酶濃度的變化用以輔助診斷。若酶濃度變化由細胞壞死或細胞膜通透性變化引起,表示臟器或組織損傷;若為細胞內(nèi)酶合成增加所致,提示組織再生、修復、成骨或異位分泌,或提示有惡性腫瘤的可能;若為酶排泄障礙引起者說明有梗阻存在。同工酶的分析與醫(yī)學網(wǎng)鑒定則能反應疾病的部位、性質(zhì)和程度。
一、轉氨酶及其同工酶
(一)生物化學特性
轉氨酶或稱氨基轉移酶是一組催化氨基在氨基酸與a-酮酸間轉移的酶類,丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和(天)門冬氨酸氨基轉移酶(AST)是其中最重要的兩種,前者俗稱為谷丙轉氨酶(GPT),后者為谷草轉氨酶(GOT)。
(二)體內(nèi)分布
AST廣泛存在于多種器官中,按含量多少順序為心、肝、骨骼肌和腎等,肝中70%存在于肝細胞線粒體中。AST有兩種同工酶ASTs 和ASTm,分別存在于可溶性的細胞質(zhì)和線粒體。細胞輕度損傷時ASTs 升高顯著,而嚴重損傷時,則ASTm大量出現(xiàn)于血清中。正常血清所含AST的同工酶主要為ASTs,但在病理狀態(tài)下,如細胞壞死,則血清中以ASTm為主。
ALT大量存在于肝臟組織中,其次為腎、心、骨骼肌等。血清ALT活性升高,通常表示肝臟損傷。ALT有兩種不同活性的同工酶a(ALTs)、b(ALTm),分別存在于細胞質(zhì)及線粒體,后者的活性為前者的16倍。肝細胞壞死血清中以ALTm為主。
(三)測定方法
轉氨酶的測定方法有許多種,其中以賴氏法最常用,由于此法操作簡便、經(jīng)濟,一些小型實驗室仍在使用。目前,國內(nèi)外實驗室多采用連續(xù)監(jiān)測法進行測定。
ALT速率法測定中酶偶聯(lián)反應式為:
 ALT
L-丙氨酸 + a-酮戊二酸  L-谷氨酸 + L-丙酮酸
 LD
   丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+
AST速率法測定中酶偶聯(lián)反應式為:
   ASTL-門冬氨酸 + a-酮戊二酸 草酰乙酸 + L-谷氨酸
 MD草酰乙酸 +NADH + H+ L-蘋果酸 + NAD+
 
上述偶聯(lián)反應中,NADH的氧化速率與標本中酶活性呈正比,可在340nm檢測吸光度下降速率。根據(jù)線性反應期吸光度下降速率(-DA/min),計算出ALT、AST的活力單位。
(四)臨床意義
ALT是反映肝損傷的一個很靈敏的指標,臨床上主要用于肝臟疾病的診斷。
各種急性病毒性肝炎、藥物或酒精中毒引起的急性肝損害時,血清ALT 水平可在臨床癥狀(如黃疸)出現(xiàn)之前就急劇升高,且ALT>AST。一般而言,急性肝炎時血清ALT高低與臨床病情輕重相平行,且往往是肝炎恢復期最后降至正常的酶,是判斷急性肝炎是否恢復的一個很好指標。假如能同時測定AST,并計算DeRitis比值,即AST/ALT之比,則對于急、慢性肝炎的診斷和鑒別診斷以及判斷肝炎的轉歸也特別有價值。急性肝炎是時DeRitis比值<1,肝硬化時DeRitis比值≥2,肝癌時DeRitis比值≥3。
重癥肝炎時由于大量肝細胞壞死,血中ALT逐漸下降,而膽紅素卻進行性升高,出現(xiàn)所謂“酶膽分離”現(xiàn)象,常是肝壞死的前兆。
AST主要存在于心肌,以往多用于AMI的診斷。AMI發(fā)病6~8h即升高,48~60h達到高峰,4d~5d恢復正常。但由于AST在AMI 時升高遲于CK,恢復早于LD,故診斷AMI價值不大。在急性肝炎時,AST雖亦顯著升高,但升高程度不及ALT,而在慢性肝炎,特別是肝硬化時,AST升高程度超過ALT。膽道疾患時AST亦可升高。

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