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氫化可的松的測(cè)定—高效液相色譜法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 氫化可的松的測(cè)定—高效液相色譜法
方法名稱:
氫化可的松的測(cè)定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定氫化可的松的含量。

本方法適用氫化可的松。

方法原理:

供試品和內(nèi)標(biāo)均制成甲醇溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處檢測(cè)氫化可的松(C21H30O5)和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值,計(jì)算出其含量。

試劑:

甲醇

儀器設(shè)備:

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論板數(shù)按氫化可的松峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。氫化可的松峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相:水 甲醇= 30 70

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):240nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備:

1. 稱取供試品

取本品適量,精密稱定。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取氫化可的松對(duì)照品適量,加甲醇溶解并稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取炔諾酮適量,加稀甲醇制成每1mL中約含有0.40mg的溶液,即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液,即得供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟:

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液5mL,置25mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,混合均勻,取10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處測(cè)定氫化可的松和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得。氫化可的松對(duì)照品溶液,同法測(cè)定。

參考文獻(xiàn):

中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.402。

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