方法名稱: |
氫化可的松的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定氫化可的松的含量。 本方法適用氫化可的松。 |
方法原理: |
供試品和內(nèi)標(biāo)均制成甲醇溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處檢測(cè)氫化可的松(C21H30O5)和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值,計(jì)算出其含量。 |
試劑: |
甲醇 |
儀器設(shè)備: |
1. 儀器 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論板數(shù)按氫化可的松峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000。氫化可的松峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。 2. 色譜條件 |
試樣制備: |
1. 稱取供試品 取本品適量,精密稱定。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取氫化可的松對(duì)照品適量,加甲醇溶解并稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液。 3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備 取炔諾酮適量,加稀甲醇制成每1mL中約含有0.40mg的溶液,即得。 4. 供試品溶液的制備 上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.5mg的溶液,即得供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液5mL,置25mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,混合均勻,取10μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)240nm處測(cè)定氫化可的松和內(nèi)標(biāo)炔諾酮的吸收值,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算,即得。氫化可的松對(duì)照品溶液,同法測(cè)定。 |
參考文獻(xiàn): |
中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.402。 |