作為分子生物學(xué)發(fā)展的重要組成部分，DNA重組及基因工程技術(shù)給生命科學(xué)帶來了革命性變化，促進(jìn)著生命科學(xué)各學(xué)科研究和應(yīng)用的進(jìn)步，對推動醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的發(fā)展同樣起著重要的作用。
一、對人類遺傳信息的認(rèn)識
遺傳信息決定生物的形態(tài)和特征，是生物生存之本。估計人類的基因組DNA約有4×109bp，含有約5-10萬個基因，但至今人類對自己賴以生存繁衍的這個龐大的遺傳信息庫還知之甚少，目前已經(jīng)知道的人基因只占估計數(shù)的百分之幾，已搞清楚其表達(dá)調(diào)控者更寥寥無幾，對占基因組80-90%不為蛋白質(zhì)編碼序列的認(rèn)識更少，因而實際上我們現(xiàn)在對自己生存的基礎(chǔ)和實質(zhì)只有很表面的膚淺認(rèn)識，設(shè)想如果人類掌握了自身全部遺傳信息的結(jié)構(gòu)、功能、表達(dá)和調(diào)控，無疑將能夠深刻認(rèn)識人的生長、發(fā)育、生存、繁衍的整個生老病死歷程，將能對疾病的診斷、治療和預(yù)防提出極有效的措施，將能真正掌握自己生存和發(fā)展的命運(yùn)。
DNA重組技術(shù)的出現(xiàn)和發(fā)展，就使人們有可能去深入探索這個重大的課題。1985年提出的人基因組研究計劃（Human Genome Project)很快得到世界科學(xué)的響應(yīng)，這個研究計劃的目標(biāo)是要闡明人類遺傳信息的組成和表達(dá)，是迄今全球性生物學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域最引人注目的巨大研究工程。DNA重組是完成這個任務(wù)的主要手段，其中包括大片段DNA克隆、DNA的大尺度分析、全自動DNA序列測定，基因組信息數(shù)據(jù)庫的建立等新思維和新技術(shù)的不斷出現(xiàn)和發(fā)展，再加上大規(guī)模引入其它領(lǐng)域先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)，原預(yù)定21世紀(jì)頭10年繪制出完整的人類染色體基因定位圖、測定出人類基因組全部DNA序列，有望按期或提前完成。當(dāng)然在這基礎(chǔ)上要搞清楚全部人類基因的功能、各基因間的關(guān)系，基因表達(dá)調(diào)控、人類遺傳信息的多樣性等還要經(jīng)歷更長期和更艱苦的努力。但DNA重組技術(shù)促進(jìn)了分子生物學(xué)迅速發(fā)展，給人類探索自身生命的奧秘展示了光明的前景。
生命關(guān)鍵的基礎(chǔ)在于蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)與核酸相的相互作用，生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能的聯(lián)系正是生命“活”的本質(zhì)所在。憑借基因工程人們可以克隆獲得天然的或任意設(shè)計的核酸序列，可以大量獲得過去難以得到的生物體內(nèi)極微量的活性蛋白質(zhì)、可以設(shè)計獲得任意定點突變（site-directed mutagenesis)的基因和蛋白質(zhì)，這就為研究蛋白質(zhì)與核酸的結(jié)構(gòu)與功能、揭露生命的本質(zhì)提供了很有力的手段。
二、基因工程藥物與疫苗
利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)有應(yīng)用價值的藥物是當(dāng)今醫(yī)藥發(fā)展一個重要的方向，現(xiàn)在世界上已有幾千家生物技術(shù)公司，其中多數(shù)都生產(chǎn)醫(yī)藥或醫(yī)藥研究所需的試劑。利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥物有兩個不同的途徑：一是利用基因工程技術(shù)改造傳統(tǒng)的制藥工業(yè)，例如用DNA重組技術(shù)改造制藥所需要的菌種或創(chuàng)建的菌種，提高抗菌素、維生素、氨基酸產(chǎn)量等；二是用克隆的基因表達(dá)生產(chǎn)有用的肽類和蛋白質(zhì)藥物或疫苗，雖然基因診斷和醫(yī)藥研究試劑的基因工程產(chǎn)品已經(jīng)很多，但目前基因工程藥物還只處在發(fā)展的早期，至今真正被衛(wèi)生部門正式批準(zhǔn)投放市場的基因工程肽或蛋白類治療藥物現(xiàn)在還不多，但正在開發(fā)的基因工程治療藥物卻有幾百種，且而逐年迅速增加，可見其具有的巨大潛力�；蚬こ趟幬锊粌H用于醫(yī)藥上，還能用于工農(nóng)業(yè)上，促進(jìn)生產(chǎn)的發(fā)展，已經(jīng)投放市場或近期可望投放市場的基因中程藥物可舉出以下例子。
1、基因工程疫菌 乙型肝炎是常見的傳染病，過去從病人血液中分離乙肝病毒的表面抗原作為疫苗，來源有限，價格昂貴，有潛在交叉感染的危險。現(xiàn)在克隆得病毒編碼的HbsAg基因，使其表達(dá)獲得大量HbsAg用作疫苗。1986年美國正式批準(zhǔn)基因工程乙肝疫苗投放市場，我國的科學(xué)工作者也克隆得在我國流行常見乙肝病毒亞型的HbsAg基因，研制得適用于我國乙肝基因工程疫苗，并已生產(chǎn)和使用。近期可能投放市場的還有甲型肝炎、巨細(xì)胞病毒、流行性出血熱、輪狀病毒、細(xì)菌性腹瀉等基因工程疫苗。我軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院研制的仔畜腹瀉基因工程疫苗，使仔畜免遭大腸桿菌腹瀉之害，保護(hù)率達(dá)90%以上，為我國的肉食供應(yīng)做出了貢獻(xiàn)。
2、基因工程肽類藥物 由免疫細(xì)胞和其它細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子是具有很高活動性的肽類分子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長分化、調(diào)節(jié)免疫功能、參與炎癥反應(yīng)和創(chuàng)傷修復(fù)中起重要作用，其中許多很有應(yīng)用價值，但其生成量極微，難以提取獲得，基因工程則可克隆其基因，使之表達(dá)獲得大量產(chǎn)物供用。傳統(tǒng)的肽類激素，血液中的微量活性成分、酶類同樣可用基因工程手段獲得。表20-3列出一些已上市的正在研制的基因工程多肽藥物。
表20-3 基因工程肽類藥物
| 名稱 | 作用 |
| 各種干擾素(interferon IFN) | 抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié) |
| 各種細(xì)胞介素(interleukins ,IL) | 免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)造血 |
| 各種集落刺激因子(colony stimulating factors ,CSF) | 刺激造血 |
| 紅細(xì)胞生成素(erythropopoetin EPO) | 促進(jìn)紅細(xì)胞生成，治療貧血 |
| 腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF) | 殺傷腫瘤細(xì)胞、免疫調(diào)節(jié)、參與炎癥和全身性反應(yīng) |
| 表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF) | 促進(jìn)細(xì)胞分裂、創(chuàng)傷愈合、胃腸道潰瘍防治 |
| 神經(jīng)生長因子(nerve growth factor ,NGF) | 促進(jìn)神經(jīng)纖維再生 |
| 骨形態(tài)形成蛋白(bone morphogenetic protein ,BMP) | 骨缺損修復(fù)、促進(jìn)骨折愈合 |
| 組織纖溶酶激活劑(tissue-type plasminogen activator ,t-PA) | 溶解血栓、治療血栓疾病 |
| 血凝因子Ⅷ、Ⅸ | 治療血友病 |
| 生長激素（rgowth hormone ,GH) | 治療侏儒癥 |
| 胰島素(insulin) | 治療糖尿病 |
| 超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD) | 清除自由基、抗組織損傷、抗衰老 |
3、基因工程抗體 用傳統(tǒng)細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)制備的單克隆抗多數(shù)是鼠源性抗體，用于人體會產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，用雜交瘤方法制備人源性抗體又遇到難以克服的困難。用基因工程的方法可以不經(jīng)過雜交瘤技術(shù)而直接獲得特定的人的抗體基因克隆。也可以計算機(jī)輔助設(shè)計，用DNA重組技術(shù)將鼠源性抗體基因人源化，然后放入表達(dá)載體，表達(dá)產(chǎn)生人源化抗體。我國已成功克隆得到多種腫瘤、抗病毒、抗細(xì)胞因子、抗細(xì)胞受體等不同單克隆的基因，鼠源性抗人肝癌、抗人黑色素瘤、抗人纖維蛋白抗體基因的人源化工作正在進(jìn)行，并已成功直接獲得人源性抗乙型肝炎病毒抗體基因。不同類型的抗體基因已分別在細(xì)菌、昆蟲細(xì)胞、培養(yǎng)的哺乳細(xì)胞和植物中表達(dá)�；蚬こ炭贵w被稱為第三代抗體，其研制雖然剛起步，但已展示出良好的應(yīng)用前景。醫(yī).學(xué)全.在.線jfsoft.net.cn
三、轉(zhuǎn)基因動物和植物
克隆的基因不僅導(dǎo)入細(xì)菌和培養(yǎng)的細(xì)胞，而且能轉(zhuǎn)入動植物體內(nèi)、改變其遺傳特性。轉(zhuǎn)基因動物（transgenic animals)就是指在其基因組內(nèi)穩(wěn)定地整合有外源基因、并能遺傳給后代的動物。1979年Mintz等將SV40病毒NDA導(dǎo)入小鼠早期胚胎的囊胚腔，第一次得到載有人工導(dǎo)入外源基因的嵌合體小鼠（chimeic morse)。1982年P(guān)almiter等將克隆的生長激素基因用顯微注射（microinjection)的方法直接導(dǎo)入小鼠受精卵細(xì)胞核內(nèi)，所得轉(zhuǎn)基因的小鼠的肝、肌、心等組織都能產(chǎn)生生長激素，小鼠比原個體大幾倍，稱為“巨鼠”，使人們意識到轉(zhuǎn)基因技術(shù)的巨大潛力及其在遺傳育種方面的劃時代意義，除受精卵外，從胚胎中分離的多潛能干細(xì)胞（ES細(xì)胞,embryonic stem cells)也能接受外源基因發(fā)育成個體，外源基因的導(dǎo)入還可以采取逆轉(zhuǎn)錄病毒載體感染等方法。目前已經(jīng)得到的轉(zhuǎn)基因動物除鼠外還有轉(zhuǎn)基因兔、羊、豬等。
利用轉(zhuǎn)基因動物可以建立人類疾病的動物模型，為對人類疾病病因研究，以及測試新治療方法提供了有力手段。例如用導(dǎo)入各種癌基因、致瘤病毒基因或其調(diào)控序列等的轉(zhuǎn)基因小鼠，可以觀察腫瘤發(fā)生的歷程和影響因素；導(dǎo)入相關(guān)突變基因的轉(zhuǎn)基因動物可以造出糖尿病、鐮刀形細(xì)胞貧血、白內(nèi)障等疾病模型；用肝炎病毒基因的轉(zhuǎn)基因動物可以研究肝炎病毒基因在肝炎病中的作用，利用導(dǎo)入各種細(xì)胞因子基因、免疫功能基因、以及特定核酸序列的轉(zhuǎn)基因動物可以從整體研究細(xì)胞因子、免疫調(diào)控、基因表達(dá)調(diào)控等問題。
近年來轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)又有新的發(fā)展。ES細(xì)胞導(dǎo)入與目的基因同源的序列，則在體內(nèi)可以經(jīng)同源重組使用的基因發(fā)生突變，這樣成長起來的動物有目的基因的缺陷，這種技術(shù)稱為基因打靶（gene targetting)。用基因打靶可以在整體水平上研究基因的功能，并能制造出遺傳缺陷的疾病模型。
用轉(zhuǎn)基因動物還能獲得治療人類疾病的重要的蛋白質(zhì)。例如導(dǎo)入了凝血因子Ⅸ基因的轉(zhuǎn)基因綿羊分泌的乳汁中含有豐富的凝血因子Ⅸ，能在效地用于血友病的治療。
轉(zhuǎn)基因技術(shù)在遺傳育種上闖出了新路。成功獲得“巨鼠”，激起了人們的創(chuàng)造優(yōu)良品持家畜的熱情。我國水生生物研究所將生長激素基因轉(zhuǎn)入魚受精卵，得到的轉(zhuǎn)基因魚生長顯著加快、個體增大；轉(zhuǎn)基因豬也正在研制中。
轉(zhuǎn)基因植物在育種上也獲得成績。1994年比普遍西紅柿保鮮時間更長的轉(zhuǎn)基因西紅柿投放市場，1996年轉(zhuǎn)基因玉米、轉(zhuǎn)基因大豆相繼投入商品生產(chǎn)。美國最早研制得抗蟲棉花，我國科學(xué)家將自己發(fā)展的蛋白酶抑制劑基因轉(zhuǎn)入棉花獲得抗棉鈴蟲的棉樺株。到1996年全世界已有250萬公頃土地種植轉(zhuǎn)基因植物。與按傳統(tǒng)孟德爾遺傳規(guī)律育種比較，轉(zhuǎn)基因技術(shù)顯出其優(yōu)越和更大的潛力，提高光合作用、擴(kuò)大固氮能力、提高營養(yǎng)價值、抗蟲、抗病、抗旱等轉(zhuǎn)基因植物都在研究中。將人的基因轉(zhuǎn)入植物還可能獲得醫(yī)學(xué)上的治療用途的藥物，例如將人抗體基因轉(zhuǎn)入煙草，從煙葉中就能提取得人的抗體蛋白。
