采用間接ELISA方法檢測胃十二指腸疾病患者血清中抗幽門螺桿菌(Hp)抗體IgG,以檢測各型胃、十二指腸疾病患者的Hp感染情況,并對檢測結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)和/或涂片(培養(yǎng)30例,涂片48例)進(jìn)行分析對比。本文探討了胃炎、胃及十二指腸潰瘍病患者血清抗Hp抗體IgG測定的臨床應(yīng)用價值。
1 對象和方法
1.1 對象
淺表性胃炎患者17例,萎縮性胃炎患者8例,胃潰瘍患者14例,十二指腸球潰瘍患者12例。全部病例均經(jīng)臨床、病理診斷確診。血液標(biāo)本采取后立即分離出血清置-20℃凍存?zhèn)錂z。
1.2 方法
抗Hp抗體IgG檢測用ELISA試劑。所用包被用Hp抗原、正常陰性對照血清、辣根過氧化酶標(biāo)記的羊抗人IgG結(jié)合物均由上海第二醫(yī)科大學(xué)提供。采用ELISA間接法,按提供試劑單位制定的抗Hp抗體IgG檢測程序進(jìn)行。方法簡述如下:用10μg/ml的抗原(多株Hp超聲粉碎物)包被聚苯乙烯反應(yīng)板,0.1ml/孔,4℃過夜。用10jfsoft.net.cn/yishi/%牛血清磷酸緩沖液(pH7.4)封閉37℃1h。加待檢樣品為稀釋度1:200的病人血清,37℃結(jié)合2h。加辣根過氧化酶標(biāo)記的羊抗人IgG抗體37℃孵育。最后加鄰苯二胺作基質(zhì),2M硫酸手反應(yīng)終止劑。每加一層試劑時用0.05%PBSTWeen20(pH7.4)洗滌3次。顯色后用DG—3022型酶聯(lián)儀在490nm波長測定OD值,標(biāo)本OD值與血清中抗體IgG量呈正相關(guān),以標(biāo)本OD值比陰性對照OD值(每板設(shè)兩孔以上,取平均值),大于1.70者為血清抗Hp抗體IgG陽性。
2 結(jié)果
淺表性胃炎17例中,血清抗Hp抗體IgG陽性12例(70.6%),萎縮性胃炎8例中,陽性5例(62.5%),胃潰瘍14例中,陽性12例(85.7%),十二指腸球潰瘍12例中,陽性11例(91.7%)。本組51例中ELISA法檢測陽性40例(78.4%),培養(yǎng)和/或涂片檢測陽性39例(76.5%),二者無明顯差異(P>0.05)。
2 討論
至今為止,慢性胃、十二指腸疾患的病理機(jī)制尚未完全明確,F(xiàn)在多數(shù)學(xué)者認(rèn)為幽門螺桿菌的感染與慢性胃炎、胃及十二指腸潰瘍的發(fā)病有關(guān)。Hp的致病性存在于:①Hp能分泌尿素酶,將尿素分解為氨;氨對粘膜具有毒性。②Hp細(xì)胞毒,能使胃粘膜上皮細(xì)胞空泡變性。③Hp與胃上皮有特別親和力,粘附于細(xì)胞表面。④Hp尿素酶,可破壞胃粘液,導(dǎo)致粘液性改變,H+反彌散。⑤Hp分泌脂酶A,能分解膽鹽,后者對胃粘膜有毒性。⑥Hp內(nèi)毒素。⑦Hp感染致使胃體部腺粘膜PAS—AB陽性物質(zhì)減少,尤以幽門腺區(qū)域的粘膜表層細(xì)胞內(nèi)粘蛋白降低為顯著,致粘膜防御機(jī)制減弱,從而有引起胃潰瘍的可能性。上述原因可異致灶部粘膜炎細(xì)胞www.med126.com浸潤、粘膜上皮細(xì)胞水腫、充血、粘液增多變性;還可伴有血及糜爛,從而引起炎癥及潰瘍。
國外已有報(bào)道血清抗Hp抗體的IgG的測定結(jié)果與Hp菌的粘膜檢出結(jié)果間有很好的相關(guān)一致性。本文檢出結(jié)果與上述報(bào)道一致。血清抗Hp抗體IgG的測定是判斷胃炎、消化性潰瘍疾患者有無Hp感染的良好指標(biāo)。已有報(bào)道表明血清抗Hp抗體IgG當(dāng)Hp清除后可以轉(zhuǎn)陰。本文測定結(jié)果表明,ELISA法測定血清抗Hp抗體IgG結(jié)果與粘膜活檢的細(xì)菌培養(yǎng)和/或涂片結(jié)果之間無顯著差異,且方法簡便,不需做胃鏡檢查。血清抗Hp抗體IgG測定對臨床診斷有無Hp感染及胃、十二指腸疾患者抗菌藥物的使用、療效觀察有一定的臨床價值。