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中國(guó)幽門(mén)螺桿菌研究:胃切除標(biāo)本幽門(mén)螺桿菌與彎曲菌樣細(xì)菌觀察

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者認(rèn)為幽門(mén)螺桿菌(簡(jiǎn)稱Hp)和彎曲菌樣細(xì)菌(簡(jiǎn)稱CLOs)與胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病密切相關(guān)。為觀察上述關(guān)系,我室1987-03-02自本校兩所附屬醫(yī)院收集因胃十二指腸潰瘍和胃癌施行胃切除手術(shù)標(biāo)本84份,進(jìn)行上述兩類細(xì)菌的檢測(cè)。1 對(duì)象和方法1.1 對(duì)象…

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者認(rèn)為幽門(mén)螺桿菌(簡(jiǎn)稱Hp)和彎曲菌樣細(xì)菌(簡(jiǎn)稱CLOs)與胃炎和消化性潰瘍的發(fā)病密切相關(guān)。為觀察上述關(guān)系,我室1987-03-02自本校兩所附屬醫(yī)院收集因胃十二指腸潰瘍和胃癌施行胃切除手術(shù)標(biāo)本84份,進(jìn)行上述兩類細(xì)菌的檢測(cè)。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象

全組84例,男76例,女8例;年齡29歲~68歲;病程1月~38a。手術(shù)切除標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí),胃潰瘍27例,18例并胃粘膜慢性炎癥;十二指腸潰瘍17例,11例并胃粘膜慢性炎癥;復(fù)合潰瘍8例,3例并慢性胃炎;胃體癌25例,4例并慢胃炎;賁門(mén)癌7例。32例術(shù)前使用過(guò)不同種類的抗菌藥物:青、鏈、慶、卡、滅滴靈及痢特靈。無(wú)菌,剪取手術(shù)切下的胃大部組織中的胃體、胃竇及十二指腸球部粘膜各一塊,約1cm×1cm~1.5cm,pH7.4的PBC緩沖液1ml~2ml輸送瓶?jī)?nèi),微氧條件下,1h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢查,胃腔pH值采用pH試紙法測(cè)定。

1.2 方法

直接涂片鏡檢:將胃體、竇及十二指腸球部膜分別剪成碎塊置pH7.4組織勻漿器中研磨成漿,取少量該勻漿涂布在載玻片上,固定,革蘭染色,鏡檢,見(jiàn)革蘭陰性呈螺旋狀或呈海狀細(xì)菌為鏡檢陽(yáng)性,反之為陰性。

分離培養(yǎng):在制備直接涂片的同時(shí),取上述組織勻漿0.5ml,接種在Skirrow選擇培養(yǎng)基上(含萬(wàn)古霉素10ml/L,多粘菌素B250IU/L,TMP5ml/L),置微氧環(huán)境(O22.2,N287.8%,CO210%)。35℃~37℃培養(yǎng)48h~72h后分離,無(wú)生長(zhǎng)者繼續(xù)培養(yǎng)2d~3d再分離,培養(yǎng)1周仍無(wú)生長(zhǎng)者為培養(yǎng)陰性。據(jù)其在微氧環(huán)境,Skijfsoft.net.cn/zhicheng/rrow培養(yǎng)基生長(zhǎng)而在厭氧、需氧環(huán)境均不生長(zhǎng)的特點(diǎn),及典型細(xì)菌形態(tài)和生化反應(yīng)結(jié)果作出初步判斷。最后鑒定尿素酶(-)者為CLOS,尿素酶(+)為Hp(尿素酶試驗(yàn)以試管法為準(zhǔn))。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌檢出情況見(jiàn)表1,2,3。胃粘膜表面pH值范圍2~9。

表1 Hp/CLOs-2在消化性潰瘍和胃癌中的檢出率

病名直接涂片鏡檢陽(yáng)性率(檢出數(shù)/例)細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率(檢出數(shù)/率)
消化性潰瘍88.5(46/52)82.9(29/35)
胃潰瘍88.9(24/27)88.2(15/17)
十二指腸潰瘍94.1(16/17)81.8(9/11)
復(fù)合潰瘍75.0(6/8)71.4(5/7)
胃癌68.8(22/32)57.1(12/21)
胃體癌72.0(18/25)64.7(11/17)
賁門(mén)癌57.1(4/7)25.0(1/4)

2.2 病理特點(diǎn)

病理觀察發(fā)現(xiàn)在慢性淺表性胃炎的粘膜組織中,常見(jiàn)有彎曲菌寄生,數(shù)量隨炎癥加重相應(yīng)增多,且呈叢狀分布。細(xì)菌不但在竇部寄生,同樣炎癥波及體部時(shí),體部粘膜亦有彎曲菌存在。個(gè)別粘膜正常也能檢出極少量的彎曲菌,多單獨(dú)存在。慢性萎縮性胃炎樟明顯腸腺化生時(shí),細(xì)菌量明顯減少,多呈散在、單獨(dú)分布。細(xì)菌多存在上皮層表面,尤其在胃小凹處更為明顯。

表2 Hp/CLOs-2在不同疾病的檢出情況

病  名HpCLOs-2Hp+CLOs-2
胃潰瘍745
十二指腸潰瘍81 
復(fù)合潰瘍32 
胃體癌632
賁門(mén)癌1  
合 計(jì)2598

表3 胃十二指腸粘膜Hp/CLOs-2檢出情況

 胃體胃竇球部
涂片陽(yáng)性率(%)69.1
(58/84)
71.65
(58/81)
5.6
(40/72)
培養(yǎng)陽(yáng)性率(%)   
CLOs-225.0
(10/40)
12.5
(5/40)
13.9
(5/36)
Hp57.5
(23/40)
67.5
(27/40)
50.0
(18/36)

3 討論

近10年,國(guó)內(nèi)外有關(guān)這方面的文獻(xiàn)報(bào)道不少。Hp和CLOs胃潰瘍檢出率為57%~85%,十二指腸潰瘍?yōu)?0%~100%,胃癌為19%~25%。提出上述兩類細(xì)菌可能是慢性胃炎及消化潰瘍的病原菌,尤其與十二指腸潰瘍關(guān)系更為密切。而與胃癌的發(fā)病無(wú)直接關(guān)系。我室檢測(cè)結(jié)果顯示胃潰瘍、十二指腸潰瘍及復(fù)合潰瘍?nèi)叩臋z出率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異。胃癌的檢出率為68.8%,明顯高于文獻(xiàn)報(bào)道。胃體與賁門(mén)間檢出率差異無(wú)顯著性。消化性潰瘍檢出率高于胃癌檢了率則有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的意義。

42例陽(yáng)性檢出病例中,單純Hp感染占首位,以竇部檢出機(jī)會(huì)較多,多見(jiàn)于十二指腸潰瘍。其次是單純CLOs感染和混合感染;旌细腥颈憩F(xiàn)為不同部位的胃粘膜分別寄生著不同jfsoft.net.cn的彎曲菌,以胃潰瘍病例檢出較高。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)這類細(xì)菌多成叢寄生在胃粘膜上皮細(xì)胞表面,尤其在胃小凹處。被寄生的粘膜細(xì)菌呈特有炎性改變,未被寄生者則正常或基本正常。因此,增加受檢部位,可提高陽(yáng)性檢出率。病變?cè)缙谌艚o適當(dāng)抗生素治療,隨細(xì)菌殺滅,炎性粘膜可逐步修復(fù)正常,但仍有復(fù)發(fā)的可能。Glupczynski等觀察,口服羥氨芐青霉素治療急性胃炎有效,但停藥后1個(gè)月,100%病例彎曲菌再現(xiàn),胃炎復(fù)發(fā)。

彎曲菌的感染不受胃腔pH值的影響,本文陽(yáng)性檢出病例中,胃腔內(nèi)pH為2~9?赡苁沁@類細(xì)菌主要寄生于覆蓋在胃粘膜上的粘液層與胃上皮細(xì)菌之間,盡管胃腔內(nèi)pH變化很大,但該層pH值通常保持在7.0左右。張振華等用透射電鏡觀察在壁細(xì)胞泌酸小管內(nèi)可見(jiàn)到幽門(mén)彎曲菌CLOs,指出該菌有耐酸力。

現(xiàn)已證明這兩類細(xì)菌非人類共生菌。人類胃粘膜上的彎曲菌來(lái)源問(wèn)題至今仍不清楚,有文獻(xiàn)提示在某些物胃粘膜上也能檢出這類細(xì)菌。人體內(nèi)彎曲菌是否來(lái)源于動(dòng)物,有待進(jìn)一步探討。

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