細(xì)胞癌基因的激活是指原本不致癌c-onc在特定的情況下轉(zhuǎn)變成致癌性的,大體上有以下幾種激活方式。
1、插入激活 例如逆轉(zhuǎn)錄病毒MoSV感染鼠類成纖維細(xì)胞后,病毒基因組的LTR整合到細(xì)胞癌基因c-mos鄰近處,使c-mos處于LTR的強(qiáng)啟動子和增強(qiáng)子作用之下而被激活,導(dǎo)致成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肉瘤細(xì)胞,又如禽類白細(xì)胞增生病毒ALV的E成分整合到雞細(xì)胞基因組c-myc附近?墒筩-myc激活。因此在基因治療中使用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體時必需考慮細(xì)胞癌基因的插入激活問題。
2、突變激活 典型的是各種ras基因的激活,參看表22-2。
表22-2 正常Ras蛋白和轉(zhuǎn)化Ras蛋白中氨基酸的變異
ras基因 | 氨基酸的位置 | |||
12 | 13 | 59 | 61 | |
H-ras-1來源的 正常人c-H-ras-1 人EJ膀胱癌癥 人HS242乳癌 鼠Harvey病毒v-H-ras | Gly GGC Val GTC Arg CGC | Gly | Ala Thr | Gln CAG Leu CTG |
K-ras-2來源的 正常人c-K-ras-2 人Caalu肺癌 人SW480結(jié)腸癌 鼠Kirsten病毒v-K-ras | Gly Lys TGT Val GTT Ser | Gly | Ala Thr | Gln |
N-ras來源的 正常人N-ras 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤 人早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞系 人纖維肉瘤 人AML33 | Gly | Gly Asp | Ala | Gln Lys Lys Lys |
ras基因的表達(dá)產(chǎn)物Ras是一種小分子G蛋白,在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用,正常Ras的作用因其自身的GTP酶活性而受到嚴(yán)格控制,而突變了的Rad其GTP酶活性下降或喪失,失去了原有控制,致使增殖信號持續(xù)作用,細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,如圖22-3所示。
圖22-3 Ras與GTP/GDP的相互作用及突變的RasR的作用
3、基因擴(kuò)增 已發(fā)現(xiàn)人類腫瘤細(xì)胞中擴(kuò)增的細(xì)胞癌基因如下表。
表22-3 人類腫瘤細(xì)胞中擴(kuò)增的細(xì)胞癌基因
c-onc | 腫瘤 | 擴(kuò)增倍數(shù) | DM/HSR* |
c-myc | 早幼粒白血病細(xì)胞系HL60 | 20× | + |
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 | 5-30× | ? | |
N-myc | 原發(fā)神經(jīng)母細(xì)胞瘤Ⅲ-Ⅳ級及神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 | 5-1000× | + |
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 | 10-200× | + | |
小細(xì)胞肺癌 | jfsoft.net.cn/yaoshi/50× | + | |
L-myc | 小細(xì)胞肺癌 | 10-20× | ? |
c-myb | 急粒AML | 5-10× | ? |
結(jié)腸癌細(xì)胞系 | 10× | ? | |
c-erbB | 類表皮癌細(xì)胞系,原發(fā)膠質(zhì)瘤 | 30× | ? |
c-K-ras | 原發(fā)肺癌,結(jié)腸癌,膀胱癌,直腸癌 | 4-20× | ? |
N-ras | 乳癌細(xì)胞系 | 5-10× | ? |
*DM:雙微體;HSR:均勻染色區(qū)
4、基因重排/染色體易位
典型的如伯基特淋巴瘤細(xì)胞的染色體易位t(8:14),致使c-myc激活,參看表22-4和圖22-4。
圖22-4 Burkitt淋巴瘤常見的染色體易位t(8:14)
表22-4 染色體異常與癌基因重排
癌基因 | 染色體定位 | 異常 | 人類腫瘤 |
c-myc | 8q24 | t(8:14),t(8:22) | Burkitt淋巴瘤 |
t(2:8) | |||
bcl-1 | 11q13 | t(11:14) | B細(xì)胞淋巴瘤 |
bcl-2 | 18q21 | t(14:18) | |
tcl-2 | 11q13 | t(11:14) | T細(xì)胞淋巴瘤 |
c-abI | 9q34 | t(9:22) | 慢粒CML |
bcr | 22q11 | ph | |
c-mos | 8q22 | t(8:21) | 急粒AML |
c-myb | 6q22-24 | t(6:14) | 卵巢癌 |
c-sis | 22q12 | t(11:22) | Erwing網(wǎng)瘤 |
blym | 1q32-ter | 缺失,HSR | 神經(jīng)纖維瘤 |
c-K-ras | 6q21 | 斷裂 | ANLL |
6q三體性 | 視網(wǎng)膜母細(xì)胞癌 | ||
c-erbA | 17q21 | 斷裂 | ANLL |
已知B淋巴細(xì)胞中免疫球蛋白重鏈基因表達(dá)十分活躍,其啟動子為強(qiáng)啟動子,且在CH-VH之間還有增強(qiáng)子區(qū),c-myc易位后與IG重鏈基因的調(diào)控區(qū)為鄰,因而被激活。正常情況下,位于c-myc5’端的兩個啟動子受到c-myc產(chǎn)物的反饋抑制,由此重排時5’端序列有丟失,結(jié)果擺脫了抑制而表達(dá)增強(qiáng)。
不同的癌基因有不同的激活方式,一種癌基因也可有幾種激活方式。例如c-myc的激活就有基因擴(kuò)增和基因重排兩種方式,很少見c-myc的突變;而ras的激活方式則主要是突變,1985年Slamon檢測了20種54例人類腫瘤中的15種癌基因,發(fā)現(xiàn)所有腫瘤都不止一種癌基因發(fā)生改變。細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明,各種癌基因之間存在協(xié)同作用。例如,單獨(dú)v-myc或EJ-ras都不能使大鼠胚胎成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化,但是若將二者共轉(zhuǎn)染PEF,8天后80%的細(xì)胞發(fā)生變化,那么為什么單獨(dú)EJ-ras又可使Rat-1細(xì)胞轉(zhuǎn)化呢?原因是該細(xì)胞并非正常,而是已經(jīng)永生化了的細(xì)胞,如果先用化學(xué)誘癌物或射線使正常大鼠原代成纖維細(xì)胞永生化,然后再用EJ-ras轉(zhuǎn)染,則可使之轉(zhuǎn)化,因此Weingerg按轉(zhuǎn)染細(xì)胞表型的變化將癌基因分為兩個類,一類是核內(nèi)作用的能使細(xì)胞永生化的癌基因,例如myc,fos等,另一類是引起細(xì)胞惡性表型變化的定位于質(zhì)膜和胞漿的癌基因,例如ras、erbB、src等。事實(shí)表明腫瘤的發(fā)生是多步驟,多因素的,不同的癌基因作用于jfsoft.net.cn/job/腫瘤發(fā)生的不同階段。
不僅癌基因之間有協(xié)同作用,癌基因與抑癌基因之間也存在協(xié)同作用。