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用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 上海交通大學(xué)/唐克軒;龔一富;廖志華;苗志奇;孫小芬
公開(公告)號 CN1807631A  
公開(公告)日 2006.07.26  
申請(專利)號 CN200610023234.3  
申請日期 2006.01.12  
專利名稱 用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法  
主分類號 C12N15/29(2006.01)I  
分類號 C12N15/29(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 上海交通大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 唐克軒;龔一富;廖志華;苗志奇;孫小芬  
地址 200240上海市閔行區(qū)東川路800號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專利事務(wù)所  
代理人 王錫麟;王桂忠  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項 一種用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法,其特征在于,從長春花中克隆orca3和g10h基因,構(gòu)建含所述DNA分子的植物表達(dá)載體,用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo),將orca3和g10h基因同時導(dǎo)入長春花細(xì)胞并再生出毛狀根,PCR和熒光定量PCR檢測外源目的基因orca3和g10h的整合和表達(dá)情況,液相色譜測定長春花毛狀根中生物堿含量。  
摘要 本發(fā)明是一種生物技術(shù)領(lǐng)域的用轉(zhuǎn)錄因子提高長春花毛狀根萜類吲哚生物堿含量的方法。本發(fā)明從長春花中克隆str和g10h基因,構(gòu)建含str和g10h基因的植物表達(dá)載體,遺傳轉(zhuǎn)化長春花獲得轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根,液相色譜法測定長春花毛狀根中生物堿含量,熒光定量PCR測定長春花毛狀根生物堿生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。本發(fā)明獲得的轉(zhuǎn)基因長春花毛狀根中重要生物堿的含量顯著提高,其中長春堿含量比非轉(zhuǎn)化對照根提高了234倍,從而提供了一種提高長春花毛狀根生物堿的方法,也為生產(chǎn)具重要臨床需求的抗癌藥物長春堿和長春新堿提供了一種新方法。  
國際公布  
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