方法名稱： |
車前草—高車前甙含量測定—HPLC法 |
應(yīng)用范圍： |
車前草中高車前甙含量測定 |
方法原理： |
車前草經(jīng)甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在250nm 處測定峰面積，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算高車前甙含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)；SPD-10A紫外檢測器；C-R7A數(shù)據(jù)處理機(jī)；USA7512進(jìn)樣器(定量管20μL) 色譜條件 色譜柱:Nucleosil7-C18(4.6mm×250mm)；紫外檢測波長:335nm；流動(dòng)相：甲醇-水-1.0mol/L pH3.5磷酸鹽緩沖液(40∶55∶5,v/v)；柱溫：45℃；流量：1.0mL/min-1；紙速2mm/min |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取高車前甙對(duì)照品約5mg置25ml量瓶中，加入適量甲醇溶解后再稀釋至刻度，,搖勻，則成高車前甙標(biāo)準(zhǔn)液(0.2mg/mL)。在10.00~0.312μg/mL濃度范圍內(nèi)用流動(dòng)相稀釋成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。 供試品溶液制備 車前草細(xì)粉約1.0g，置于磨口錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱重，置超聲振蕩器中2.0h，稱重，補(bǔ)加甲醇至原重，過濾，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，精密量取續(xù)濾液1.0mL置于10mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。 |
操作步驟： |
精密吸取供試品溶液20μl注入液相色譜儀，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算高車前甙含量。 裴云萍,吳正紅,方蕓.高效液相色譜法測定車前草中高車前甙的含量.中成藥.1999,21(7):370-372 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
裴云萍,吳正紅,方蕓.高效液相色譜法測定車前草中高車前甙的含量.中成藥.1999,21(7):370-372 |
