方法名稱: |
車前草--桃葉珊瑚苷含量測定—HPLC法 |
應(yīng)用范圍: |
用于測定車前草中桃葉珊瑚苷含量 |
方法原理: |
車前草經(jīng)甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在206nm處測定峰面積,標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算高車前甙含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器設(shè)備 Beckman Coulter 高效液相色譜儀;G1311AQuat泵;G1314A紫外檢測器;Agilent1100色譜工作站; 色譜條件 色譜柱:Hypersil C18柱(4. 6mmi.d.×200mm,5mm);紫外檢測波長:206nm;流動相:乙腈-水(2∶98,V/V);柱溫:26℃;流速:1ml/min;進樣:10ml。 |
試樣制備: |
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 將桃葉珊瑚苷對照品用50 %的甲醇在26.2~1045mg/ m濃度范圍內(nèi)配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液,各精密吸取20μl,注入液相色譜儀,按照上述色譜條件測定峰面積,以進樣量的自然對數(shù)為橫坐標(biāo),色譜峰面積的自然對數(shù)為縱坐標(biāo),,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 供試品溶液的制備 精密稱取車前干粉0.5g,置于磨口錐形瓶中,精密加入甲醇10ml,稱重,靜置24h,置超聲清洗機中,超聲提取1.5h,冷卻后,再稱重,補加甲醇至原重,過濾,棄去初濾液,收集續(xù)濾液,過0.45mm微孔濾膜,取10ml進樣分析。 |
操作步驟: |
精密稱取車前樣品粉末0.50g,3次重復(fù),按供試品溶液制備法提取測定,以標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
田士林,李莉.豫南地區(qū)野生車前中桃葉珊瑚苷含量測定.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2006,34(19):4953,4988 |