芎菊上清丸－鹽酸小檗堿的測定－薄層掃描熒光法

本方法采用薄層掃描法測定芎菊上清丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥芎菊上清丸。

1. 鹽酸

2. 甲醇

3. 苯

4. 醋酸乙酯

5. 異丙醇

6. 濃氨溶液

7. 鹽酸小檗堿對照品(中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2點樣器：定量毛細管

1.3展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

1.4薄層板：以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠GF₂₅₄薄層板

1.5 超聲振蕩儀

2 實驗條件

2.1 展開劑：苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨溶液(12∶6∶3∶3∶1)

2.2 展開距離：濃氨溶液預(yù)平衡后，上行展開8ｃｍ取出，晾干。

2.3 定位：紫外燈下確定斑點位置

2.4 掃描方式：熒光鋸齒掃描，激發(fā)波長366nm，3號濾光片，狹縫2mm×2mm，靈敏度2，設(shè)背景校正。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加鹽酸-甲醇(1∶100)的混合溶液配制成0.06mg/mL的溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

本品6g，研細，過65目篩，取約1g，精密稱定，置具塞三角瓶中精密加鹽酸-甲醇(1∶100)的混合溶液25mL，稱定重量，浸泡過夜，超聲處理45min，放冷，再稱定重量，用上述溶劑補足減失的重量，濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

1. 標(biāo)準曲線的建立

　　精密吸取對照品溶液1、2、3、4、5μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑硅膠GF₂₅₄薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨溶液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑， 濃氨溶液預(yù)平衡后，上行展開8cm取出，晾干，紫外燈下確定斑點位置，進行熒光掃描測定，激發(fā)波長366nm，測量對照品熒光強度積分值，計算回歸方程Y=18611.9X 6274.9，r=0.9995；線性范圍為0.06～0.30μg。

2.供試品含量測定

精密吸取供試品溶液1～2μL(供試品點樣量在0.06～0.12μg之間)，對照品溶液1μL與2μL，分別交叉點于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑硅膠GF₂₅₄薄層板上，按標(biāo)準曲線項下方法展開，掃描測定，按外標(biāo)二點法計算鹽酸小檗堿含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標(biāo)準中對該體積移液管的精度要求。

韓桂茹，徐韌柳，趙曉春，芎菊上清丸質(zhì)量標(biāo)準研究，解放軍藥學(xué)學(xué)報，2002，18(2)：88～90