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重組人共刺激分子卡介苗菌株及其制備方法

公開(公告)號 CN100352512C  
公開(公告)日 2007.12.05  
申請(專利)號 CN200410019473.2  
申請日期 2004.06.04  
專利名稱 重組人共刺激分子卡介苗菌株及其制備方法  
主分類號 A61K48/00(2006.01)I  
分類號 A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12R1/32(2006.01)I;C12N15/19(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 天津市泌尿外科研究所;韓瑞發(fā);王靖宇;姚 智;馬騰驤  
發(fā)明(設(shè)計)人 韓瑞發(fā);王靖宇;姚 智;劉春雨;馬騰驤  
地址 300211天津市河西區(qū)平江道23號(天津市泌尿外科研究所)  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 天津市宗欣專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 董光仁  
國省代碼 天津;12  
主權(quán)項 一種重組人共刺激分子卡介苗菌株,其特征在于表達人共刺激分子B7-2的大腸桿菌-分枝桿菌穿梭表達載體,在丹麥I型卡介苗中表達,得到具有分泌活性共刺激分子B7-2功能的重組卡介苗菌株rBCG-hB7-2,該菌株分類命名為結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis);2004年03月23日由中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,菌種保藏編號CGMCC No.1120。  
摘要 本發(fā)明公開了一種重組人共刺激分子卡介苗菌株及其制備方法,屬于基因工程技術(shù),菌種保藏號:CGMCC No.1120。本發(fā)明首先進行hB7-2(IgC+IgV)片段聚合酶鏈反應(yīng)并建立質(zhì)粒pYL-hB7-2;經(jīng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,E.Coli-pYL-hB7-2單克隆菌落擴增、質(zhì)粒提取和純化;電泳、酶切及PCR反應(yīng)鑒定pYL-hB7-2質(zhì)粒:卡介苗的電轉(zhuǎn)化,rBCG-hB7-2單克隆菌落的挑選、擴增、鑒定。本發(fā)明與野生型卡介苗相比,在達到同樣的甚至增加免疫效果的條件下,卡介苗用量降低,從而降低毒副作用;避免了直接使用細胞因子帶來的高額費用和反復(fù)灌注的缺點;能在最為合適的時間和部位分泌細胞因子。一次接種可獲得強而持久的抗腫瘤免疫。本發(fā)明可望為膀胱腫瘤臨床治療提供一種新型制劑。  
國際公布  
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