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長(zhǎng)效降血糖肽的重組表達(dá)及其在糖尿病治療藥物中的應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN101003574A  
公開(公告)日 2007.07.25  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610045909.4  
申請(qǐng)日期 2006.02.21  
專利名稱 長(zhǎng)效降血糖肽的重組表達(dá)及其在糖尿病治療藥物中的應(yīng)用  
主分類號(hào) C07K19/00(2006.01)I  
分類號(hào) C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P3/10(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 大連帝恩生物工程有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃慶生;李 元;張明杰;李別虎;薛小平;王延竹;韓文君  
地址 116600遼寧省大連市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)松嵐街17號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 大連科技專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 龍 鋒  
國(guó)省代碼 遼寧;21  
主權(quán)項(xiàng) 長(zhǎng)效降血糖肽的重組表達(dá),其特征在于:氨基酸序列如下: H2N-HGEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-Linker-DAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGL-COOH 上述的‘H2N-’代表蛋白質(zhì)氨基端(N末端),‘-COOH’代表蛋白質(zhì)羧基端(C末端),Linker代表柔性連接子。序列中的氨基酸縮寫:A丙氨酸;R精氨酸;N天冬酰胺;D天冬氨酸;C半胱氨酸;Q谷氨酰胺;E谷氨酸;G甘氨酸;H組氨酸;I異亮氨酸;L亮氨酸;K賴氨酸;M甲硫氨酸;F苯丙氨酸;P脯氨酸;S絲氨酸;T蘇氨酸;W色氨酸;Y氨酸;V頡氨酸; 柔性連接子Linker的氨基酸序列為TSGGSGGS或GGSGGS或GGSGGSGGGGS或GGS。  
摘要 本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域中的基因克隆和基因表達(dá),長(zhǎng)效降血糖肽把GLP-1中二肽基肽酶作用的關(guān)鍵位點(diǎn)從原來(lái)的丙氨酸突變?yōu)楦拾彼幔鉀Q二肽基肽酶降解的問題,再與人白蛋白基因在基因水平進(jìn)行拼接,最后在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中分別表達(dá)出四種GLPAG與人白蛋白通過(guò)柔性連接子(柔性Linker)連接的融合蛋白,這種融合蛋白既保留了GLP-1的活性又能使其在體內(nèi)的半衰期大大延長(zhǎng),降血糖作用明顯,無(wú)低血糖現(xiàn)象發(fā)生。  
國(guó)際公布  
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