| 公開(公告)號 | CN1587400A |
| 公開(公告)日 | 2005.03.02 |
| 申請(專利)號 | CN200410073056.6 |
| 申請日期 | 2004.09.08 |
| 專利名稱 | 凝血酶分離純化方法 |
| 主分類號 | C12N9/74 |
| 分類號 | C12N9/74 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 陜西科技大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 馬永征;李敏康;宋宏新;王旭 |
| 地址 | 712081陜西省咸陽市人民西路49號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 徐文權(quán) |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權(quán)項 | 一種凝血酶分離純化方法，其特征在于：1)首先取動物血液為原材料，在此血液中按9∶1的體積比加入質(zhì)量百分比濃度為3.8％的檸檬酸鈉溶液作為抗凝劑；2)在4℃以2500～3000轉(zhuǎn)/分鐘的離心力下離心5～10分鐘分離獲得血漿；3)將此血漿在-20～-30℃冷凍1～3天后，2～4℃解凍，在4℃以2500～3000轉(zhuǎn)/分鐘的離心力下離心5～10分鐘分離獲得上清液；4)在每升上清液中加入80～120ml的濃度為1mol/l的BaCl2溶液，在4℃以3500～4000轉(zhuǎn)/分鐘的離心力離心5～10分鐘收集沉淀物；5)在此沉淀物中加入pH值為7.4的0.2mol/l的EDTA溶液解吸附，在4℃下以3500～4000轉(zhuǎn)/分鐘的離心力離心5～10分鐘棄去沉淀，獲得凝血酶原粗液；6)室溫下向凝血酶原粗液中加入CaCl2溶液使凝血酶原粗液濃度達到0.1mol/l，再經(jīng)DEAE——纖維素陰離子交換柱層析獲得凝血酶純品，冷凍干燥得到凝血酶成品。 |
| 摘要 | 一種凝血酶分離純化方法，首先取動物血液為原材料，將此血液加入檸檬酸鈉溶液作為抗凝劑；離心分離獲得血漿；經(jīng)冷凍、解凍，再次離心獲得上清液；在上清液中加入BaCl2離心收集沉淀物；在此沉淀物中加入EDTA溶液解吸附，再次離心棄去沉淀，獲得凝血酶原粗液；室溫下向凝血酶原粗液中加入CaCl2溶液使凝血酶原粗液濃度達到0.1mol/l，再經(jīng)DEAE——纖維素陰離子交換柱層析獲得凝血酶純品，冷凍干燥得到凝血酶成品。本發(fā)明通過將血漿冷凍，低溫解凍先有效地去除了部分纖維蛋白原，提高了凝血酶的得率，通過優(yōu)化離子交換層析獲得高純度的凝血酶，其比活力為1500U/mg蛋白，得率為0.4‰。 |
| 國際公布 |
