| 公開(公告)號(hào) | CN1594581A |
| 公開(公告)日 | 2005.03.16 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410028107.3 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.07.16 |
| 專利名稱 | 一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/62 |
| 分類號(hào) | C12N15/62;C12N15/12;C12N15/52;C12N15/81;C12P21/02 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 深圳大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 劉志剛;吉坤美;喻海瓊;高波;張紅云 |
| 地址 | 518060廣東省深圳市南山區(qū)南油大道2336號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法，包括以下步驟：通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位的32個(gè)氨基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中間含腸激酶識(shí)別切割位點(diǎn)，該融合基因克隆至酵母表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株，該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白，再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種基因工程重組技術(shù)制備人腦利鈉肽的方法。通過人工合成人腦利鈉肽BNP活性部位32個(gè)氨基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因與經(jīng)突變改造的CMP-3-脫氧-D-甘露一辛酮糖酸合成酶基因3′端融合，中間含腸激酶識(shí)別切割位點(diǎn)，該融合基因克隆至甲酵營養(yǎng)型酵母Pichia表達(dá)載體獲得該融合基因高效表達(dá)的工程酵母菌株，該工程菌經(jīng)發(fā)酵后提取層析純化制備融合蛋白，再經(jīng)腸激酶切割后分離純化獲得重組人腦利鈉肽。該重組肽經(jīng)體外試驗(yàn)表明具備人腦利鈉肽BNP生物活性。 |
| 國際公布 |
