公開(公告)號
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CN1621415A
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公開(公告)日
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2005.06.01
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申請(專利)號
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CN200310113790.6
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申請日期
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2003.11.25
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專利名稱
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一種抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體及其制備方法
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主分類號
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C07K16/10
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分類號
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C07K16/10;A61K39/395;A61K9/12;A61K9/08;A61K9/10;A61P31/14;A61P11/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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王希良;杜新安;石辛甫;張松樂;劉建源;李巖;趙光宇;田光;周華
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地址
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100071北京市豐臺區(qū)東大街20號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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北京太兆天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司
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代理人
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張韜
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項
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一種用于治療、預(yù)防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白抗體,其特征在于該抗體是的制備方法包括如下步驟:1)滅活純化SARS-CoV加入不完全福氏佐劑乳化制備免疫原,采用皮下、肌肉、腹股溝淋巴結(jié)多點免疫經(jīng)檢疫符合生物制品要求的馬匹,免疫四次、間隔10天免疫一次,試血測抗體效價對流電泳1∶128、間接酶聯(lián)免疫1∶12800,測抗體中和效價細胞病變法1∶12800、空斑減數(shù)法1∶12800,并不同SARS-CoV標準株免疫馬產(chǎn)生的中和抗體均與其它SARS-CoV毒株呈現(xiàn)一致的中和抗體活性;2)采集馬抗SARS-CoV血漿,用無熱源2倍蒸餾水稀釋加入21%飽和度硫酸銨混勻、離心棄沉淀纖維蛋白和白蛋白,上清再加入9%飽和度硫酸銨混勻離心要沉淀免疫球蛋白G,用無熱源蒸餾水恢復(fù)原體積再用30%飽和度硫酸銨混勻、離心要沉淀IgG,先加入一定量的無熱源蒸餾水、后加入無熱源0.9%氯化鈉鹽水用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮和去雜蛋白,超濾液為純化馬抗SARS-CoVIgG;3)純化的馬抗SARS-CoVIgG用鹽酸調(diào)PH至3.2后胃蛋白酶切割,再用氫氧化鈉調(diào)PH至7.4,加熱58℃、30min,用帆布過濾去Fc段,濾液為初步純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體;4)初步純化的馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體過苯基蔬水層析,用200mmol/LpH7.0磷酸緩沖液、1mol/L硫酸銨上柱,20mmol/LpH7.0磷酸緩沖液收集F(ab′)2抗體流出液,再用6萬超濾器超濾除鹽、濃縮,為純化馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種用于治療、預(yù)防及診斷SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體,特征在于該抗體為馬抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗體,同時本發(fā)明公開該抗體的制備方法。本發(fā)明抗體能特異消滅SARS-CoV,對非典型肺炎的治療和預(yù)防有很好的效果。
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國際公布
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