公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1654646A
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公開(kāi)(公告)日
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2005.08.17
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN200510037601.0
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申請(qǐng)日期
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2005.01.04
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/09
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/09;C12N15/81;C12P21/02;C07K1/14
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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南京師范大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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張雙全;張杰
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地址
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210097江蘇省南京市寧海路122號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識(shí)律師事務(wù)所
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代理人
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汪旭東
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國(guó)省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法,包括以下步驟:(1)應(yīng)用重組DNA技術(shù),構(gòu)建ABP-CM4真核表達(dá)載體,載體構(gòu)建見(jiàn)圖1;(2)ABP-CM4真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞畢赤酵母菌,構(gòu)建表達(dá)工程菌;(3)發(fā)酵培養(yǎng)工程菌,進(jìn)行甲醇誘導(dǎo)表達(dá);(4)表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)分子篩柱層析純化得重組家蠶抗菌肽CM4產(chǎn)品。
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摘要
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本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域重組蛋白質(zhì)的表達(dá)和純化,尤其是涉及重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案為:一種重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法,包括以下步驟:(1)應(yīng)用重組DNA技術(shù),構(gòu)建ABP-CM4真核表達(dá)載體,載體構(gòu)建見(jiàn)圖1;(2)ABP-CM4真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞畢赤酵母菌,構(gòu)建表達(dá)工程菌;(3)發(fā)酵培養(yǎng)工程菌,進(jìn)行甲醇誘導(dǎo)表達(dá);(4)表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)分子篩柱層析純化得重組家蠶抗菌肽CM4產(chǎn)品。本發(fā)明應(yīng)用基因工程技術(shù)在真核宿主細(xì)胞中高效表達(dá)了重組抗菌肽CM4,表達(dá)效率高,分離純化簡(jiǎn)單,易操作,易放大,穩(wěn)定性好,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),對(duì)研制新型高效抗感染藥物具有重要價(jià)值,在制藥行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。
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國(guó)際公布
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