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脂聯(lián)素-胰升糖素樣肽-1類似肽融合蛋白表達載體及構(gòu)建

公開(公告)號 CN1737150A  
公開(公告)日 2006.02.22  
申請(專利)號 CN200510050844.8  
申請日期 2005.07.22  
專利名稱 脂聯(lián)素-胰升糖素樣肽-1類似肽融合蛋白表達載體及構(gòu)建  
主分類號 C12N15/62(2006.01)I  
分類號 C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 浙江大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 趙同峰;谷 衛(wèi);詹宇紅;趙江佩  
地址 310027浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 杭州求是專利事務(wù)所有限公司  
代理人 趙杭麗;張法高  
國省代碼 浙江;33  
主權(quán)項 人脂聯(lián)素-胰升糖素樣肽-1類似肽融合基因的cDNA序列,其特征是:全長共567個bp,1-15bp編碼腸激酶識別序列,16-108bp編碼人GLP-1-A,序列長93bp,其中19-21bp將人GLP-1(7-37)編碼基因中編碼第8位基酸丙氨酸的密碼子GCT突變?yōu)楦拾彼崦艽a子GGT,109-153bp編碼接頭肽DNA序列,序列長45bp,154-564bp編碼脂聯(lián)素,序列長411bp,565-567bp為終止密碼子,該融合基因cDNA序列見SEQIDNO1。  
摘要 本發(fā)明公開了人脂聯(lián)素-胰升糖素樣肽-1類似肽融合蛋白表達載體及構(gòu)建方法。本發(fā)明運用PCR技術(shù)獲得人脂聯(lián)素和GLP-1-A編碼基因,脂聯(lián)素基因通過擴增脂聯(lián)素球狀域基因獲得,通過將人GLP-1(7-37)編碼基因中編碼第8位氨基酸丙氨酸的密碼子突變?yōu)楦拾彼崦艽a子獲得GLP-1-A編碼基因,運用酶切技術(shù),將GLP-1-A和脂聯(lián)素編碼基因定向克隆到表達載體,獲得人脂聯(lián)素-胰升糖素樣肽-1類似肽融合蛋白表達載體,經(jīng)轉(zhuǎn)化蛋白表達細(xì)菌表達出了含腸激酶識別序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白,本發(fā)明為進一步研究其活性,測定融合蛋白上GLP-1-A半衰期,得到能促進胰島β細(xì)胞分泌胰島素、能改善胰島素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。  
國際公布  
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