| 公開(公告)號 | CN1255547C |
| 公開(公告)日 | 2006.05.10 |
| 申請(專利)號 | CN200410005408.4 |
| 申請日期 | 2004.02.18 |
| 專利名稱 | 釀酒酵母重組乙型肝炎病毒表面抗原流加補料發(fā)酵工藝 |
| 主分類號 | C12P21/00(2006.01)I |
| 分類號 | C12P21/00(2006.01)I;C12R1/85(2006.01)N |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京天壇生物制品股份有限公司;天津博薈生物技術(shù)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 汪和睦;馬民強;李 津;楊云凱 |
| 地址 | 100024中國北京市朝陽區(qū)三間房南里4號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 中原信達知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 丁業(yè)平;王維玉 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種利用啤酒酵母工程菌生產(chǎn)乙肝表面抗原的方法，其中所述的啤酒酵母工程菌的受體菌是亮氨酸營養(yǎng)缺陷型的；所述的啤酒酵母工程菌包含重組2μ質(zhì)粒但不含天然的2μ質(zhì)粒；所述重組2μ質(zhì)粒包含編碼乙肝表面抗原的基因，該基因的5’端和3’端分別與3-磷酸甘油醛脫氫酶啟動子和乙醇脫氫酶I終止子可操作連接；所述重組2μ質(zhì)粒還包含編碼亮氨酸的基因，該基因的5’端和3’端分別與啟動子和終止子可操作連接；該方法包括如下步驟：1)所述啤酒酵母工程菌的種子培養(yǎng)步驟；2)利用步驟1)制得的種子進行生產(chǎn)發(fā)酵的步驟；和3)從步驟2)所得的發(fā)酵培養(yǎng)混合物中分離純化出乙肝表面抗原的步驟；該方法的特征在于，在上述步驟2)中以低于0克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加碳源；將生產(chǎn)發(fā)酵結(jié)束時的酵母細胞密度控制在30克干重/升以下。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種利用啤酒酵母工程菌生產(chǎn)乙肝表面抗原的方法，該方法包括如下步驟：1)所述啤酒酵母工程菌的種子培養(yǎng)步驟；2)利用步驟1)制得的種子進行生產(chǎn)發(fā)酵的步驟；和3)從步驟2所得的發(fā)酵培養(yǎng)混合物中分離純化出乙肝表面抗原的步驟；該方法的特征在于，在上述步驟2)中以低于1.0克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小時的速率向發(fā)酵混合物中流加碳源；將生產(chǎn)發(fā)酵結(jié)束時的酵母細胞密度控制在30克干重/升以下。 |
| 國際公布 |
