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重組家蠶抗菌肽CM4的生產(chǎn)方法

公開(公告)號 CN1294261C  
公開(公告)日 2007.01.10  
申請(專利)號 CN200510037601.0  
申請日期 2005.01.04  
專利名稱 重組家蠶抗菌肽CM4的生產(chǎn)方法  
主分類號 C12N15/09(2006.01)I  
分類號 C12N15/09(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 南京師范大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 張雙全;張 杰  
地址 210097江蘇省南京市寧海路122號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 南京知識律師事務(wù)所  
代理人 汪旭東  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項 一種重組家蠶抗菌肽CM4的生產(chǎn)方法,包括以下步驟:(1)應(yīng)用重組DNA技術(shù),構(gòu)建ABP-CM4真核表達載體pPICZaA-CM4;(2)ABP-CM4真核表達載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞畢赤酵母菌,構(gòu)建表達工程菌;(3)發(fā)酵培養(yǎng)工程菌,進行甲醇誘導(dǎo)表達;(4)表達產(chǎn)物經(jīng)sephadex G50分子篩柱層析純化得重組家蠶抗菌肽CM4產(chǎn)品。  
摘要 本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域重組蛋白質(zhì)的表達和純化,尤其是涉及重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案為:一種重組家蠶抗菌肽CM4的高效生產(chǎn)方法,包括以下步驟:(1)應(yīng)用重組DNA技術(shù),構(gòu)建ABP-CM4真核表達載體,載體構(gòu)建見圖1;(2)ABP-CM4真核表達載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞畢赤酵母菌,構(gòu)建表達工程菌;(3)發(fā)酵培養(yǎng)工程菌,進行甲醇誘導(dǎo)表達;(4)表達產(chǎn)物經(jīng)分子篩柱層析純化得重組家蠶抗菌肽CM4產(chǎn)品。本發(fā)明應(yīng)用基因工程技術(shù)在真核宿主細(xì)胞中高效表達了重組抗菌肽CM4,表達效率高,分離純化簡單,易操作,易放大,穩(wěn)定性好,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),對研制新型高效抗感染藥物具有重要價值,在制藥行業(yè)具有廣闊的應(yīng)用前景。  
國際公布  
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