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重組人血小板生成素/干細(xì)胞因子融合蛋白及其制備

公開(公告)號(hào) CN1778929A  
公開(公告)日 2006.05.31  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510094603.3  
申請(qǐng)日期 2005.09.29  
專利名稱 重組人血小板生成素/干細(xì)胞因子融合蛋白及其制備  
主分類號(hào) C12N15/62(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/866(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 南京大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 秦浚川;臧宇輝;朱 潔;袁達(dá)文  
地址 210093江蘇省南京市漢口路22號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京知識(shí)律師事務(wù)所  
代理人 高桂珍  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人血小板生成素/干細(xì)胞因子雙功能融合蛋白基因,其特征是設(shè)計(jì)并構(gòu)建一個(gè)人血小板生成素的1-157位基酸的編碼區(qū)、16個(gè)氨基酸(GGGGSPGGSGGGGSGG)的連接肽編碼區(qū)、可溶性人干細(xì)胞因子的1-145位氨基酸編碼區(qū)和終止密碼依次首尾相連接的DNA片段,重組人血小板生成素/干細(xì)胞因子融合蛋白基因的核苷酸序列為: agcccggctcctcctgcttgtgacctccgagtcctcagtaaactacttcgtgactcccat60 gtccttcacagcagactgagccagtgcccagaggttcaccctttgcctacacctgtcctg120 ctgcctgctgtggactttagcttgggagaatggaaaacccagatggaggagaccaaggca180 caggacattctgggagcagtgacccttctgctggagggagtgatggcagcacggggacaa240 ctgggacccacttgcctctcatccctcctggggcaactttctggacaggtccgtctcctc300 cttggggccctgcagagcctccttggaacccagcttcctccacagggcaggaccacagct360 cacaaggatcccaatgccatcttcctgagcttccaacacctgctccgaggaaaggtgcgt420 ttcctgatgcttgtaggggggtcaacactatgtgtcaggcgggccccacccggaggagga480 ggttccccgggcggatccggaggaggaggctccggcggcgaagggatctgcaggaatcgt540 gtgactaataatgtaaaagacgtcactaaattggtggcaaatcttccaaaagactacatg600 ataaccctcaaatatgtccccgggatggatgttttgccaagtcattgttggataagcgag660 atggtagtacaattgtcagacagcttgactgatcttctggacaagttttcaaatatttct720 gaaggcttgagtaattattccatcatagacaaacttgtgaatatagtggatgaccttgtg780 gagtgcgtgaaagaaaactcatctaaggatctaaaaaaatcattcaagagcccagaaccc840 aggctctttactcctgaagaattctttagaatttttaatagatccattgatgccttcaag900 gactttgtagtggcatctgaaactagtgattgtgtggtttcttcaacattaagttagtaa960  
摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)中的基因工程制備多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域。其目的是構(gòu)建一種血小板生成素/干細(xì)胞因子雙功能融合蛋白基因,并在昆蟲細(xì)胞中高效表達(dá)和制備生物活性更高、副作用更小的重組血小板生成素/干細(xì)胞因子雙功能蛋白(rhTPO/SCF)。rhTPO/SCF基因?yàn)橐来魏蠺PO的1-157位氨基酸編碼序列、16個(gè)氨基酸的連接肽編碼序列和SCF的1-145位氨基酸編碼序列及終止密碼子的DNA片段。從感染重組病毒的貼壁培養(yǎng)Sf9細(xì)胞中制備的rhTPO/SCF用于TF1細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),測(cè)定其比活為2.0×105units/mg;用于Mo7e細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),測(cè)定其比活為8.3×105units/mg?捎糜谥委煵∪朔暖、化療及骨髓移植等病癥引起的血小板低下。  
國(guó)際公布  
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