公開(公告)號
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CN1904036A
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公開(公告)日
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2007.01.31
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申請(專利)號
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CN200510112982.4
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申請日期
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2005.10.18
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專利名稱
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基因工程菌混合培養(yǎng)生產(chǎn)三種人α防御素的方法
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主分類號
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C12N1/21(2006.01)I
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分類號
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C12N1/21(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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甘肅亞盛鹽化工業(yè)集團有限責(zé)任公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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周長生;陳其新;李春麗;陳正華
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地址
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730030甘肅省蘭州市城關(guān)區(qū)張掖路219號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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甘肅省專利服務(wù)中心
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代理人
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田玉蘭;程 萍
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國省代碼
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甘肅;62
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主權(quán)項
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一種利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌混合培養(yǎng)生產(chǎn)具有生物活性人α防御素蛋白的方法,其中包括:使用人α防御素成熟肽優(yōu)化編碼序列,將該序列構(gòu)建到適宜的tac型表達載體pGEX4T1中,再將其轉(zhuǎn)入到篩選出的抗細胞毒性的大腸桿菌BL21(DE3)pLysS中,從而構(gòu)建成含外源基因的三種工程菌株P(guān)HS1、PHS2、PHS3,并將上述菌體混合培養(yǎng)來生產(chǎn)人α防御素蛋白。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌混合培養(yǎng)生產(chǎn)具有生物活性的人α防御素蛋白的新方法。包括:使用人α防御素成熟肽優(yōu)化編碼序列,將該序列構(gòu)建到適宜的tac型表達載體pGEX4T1中,再將其轉(zhuǎn)化入篩選出的抗細胞毒性的大腸桿菌BL21(DE3)pLysS中,從而構(gòu)建成含外源基因的三種工程菌株P(guān)HS1、PHS2、PHS3。它們的特點是均能抵抗表達蛋白對細胞的毒性,從而使表達量顯著提高。將三種工程菌進行等量混合培養(yǎng),經(jīng)化學(xué)誘導(dǎo)表達人α防御素,可同時生產(chǎn)出三種人α防御素蛋白的混合蛋白。用上述方法生產(chǎn)的蛋白可能對病原菌的抗性具有協(xié)同的作用。用本法生產(chǎn)α防御素可應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域。
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國際公布
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