方法名稱： |
九分散－麻黃堿含量的測(cè)定－薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用薄層掃描法測(cè)定九分散中麻黃堿的含量。 本方法適用于九分散的干燥根及根莖。 |
方法原理： |
樣品液與對(duì)照品液點(diǎn)于同一硅膠G板上按相同條件展開，顯色，二者在相同位置上有特征斑點(diǎn)，以特征斑點(diǎn)進(jìn)行光譜掃描，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，經(jīng)計(jì)算得到麻黃堿的含量。 |
試劑： |
1. 氯仿，甲醇，濃氨水均為色譜純及分析純 2. 茚三酮乙醇液為顯色劑 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 CS-9000雙波長薄層掃描儀（日本島津) 1.2 硅膠板 G-CMC-CNa板 2 色譜條件 2.1 展開劑：氯仿-甲醇-濃氨水（3：3：0.1) 2.3：顯色劑:0.2%茚三酮乙醇液 2.4 檢測(cè)波長：515nm，415nm 2.5 烘干條件：105℃，5min |
試樣制備： |
1. 樣品液制備 精密稱取九分散樣品適量（約2g)，加適量乙醇浸泡，超聲提取，濾過,濾液水浴蒸干,以0.1mol/L鹽酸15ml完全轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,用濃氨水調(diào)pH至10,氯仿萃取(20ml一次,10ml8次),合并氯仿液,回收至小體積,過中性氯化鋁柱(1.0g,100～200目,Φ10mn)以氯仿洗脫約30ml,回收轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,定容,備用。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的鹽酸麻黃堿25.12mg,置10ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,即得對(duì)照液。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密吸取麻黃堿對(duì)照液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0μl點(diǎn)樣,按上述色譜條件展開,顯色烘干,測(cè)定,結(jié)果得回歸方程。 2. 樣品的測(cè)定 分別精密吸取樣品供試液4.0μl,麻黃堿對(duì)照液3.0μl,4.0μl,在同一硅膠G板上隨行點(diǎn)樣,按上述色譜條件展開,顯色,顯色烘干后,用一塊干凈玻璃蓋上,周圍用膠布固定,測(cè)定其峰面積,按外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算出含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
寧文.九分散中馬錢子堿與麻黃堿含量測(cè)定的研究.廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，6（3)：59-60. |
