黃連上清丸—黃芩甙的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定黃連上清丸中黃芩甙的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

將供試品加甲醇超聲提取，加水定容，離心，取上清液即為供試品液。精密吸取供試品液20µL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處檢測黃芩甙吸收值，以外標法計算含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 醋酸銨

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Shim-Pack CLC-ODS 柱 (150 × 6mm)。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 醋酸銨 = 40 60

2.2 流速：1mL/min

2.3 檢測波長：275nm

2.4 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末(過40目篩) 0.1g。

2. 對照品溶液的制備

準確稱取黃芩甙10mg，置10mL容量瓶中，加少量甲醇溶解后，加水至刻度，作為對照品儲備液。

3. 標準溶液的制備

將對照品儲備液稀釋成每1µL含0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg黃芩甙的溶液，作為繪制標準曲線的系列濃度標淮溶液。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置100mL容量瓶中，加45％甲醇30mL超聲提取1h，用水定容至100mL，混勻，取適量置離心管中，15000r/min．離心5min，取上清液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1.標準曲線的繪制

精密吸取上述標準溶液20µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處測定黃芩甙的吸收值，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

精密吸取供試品液20µL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長275nm處測定黃芩甙的吸收值，用外標法計算出其含量。

曹瑋,石躍玲. HPLC法測定黃連上清丸中黃芩甙的含量. 云南中醫(yī)中藥雜志，1999，19(6)：29-30.