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天麻素的純化技術(shù)
近年來有學者采用了大孔樹脂吸附法-醇沉純化天麻素，選擇非極性至極性共計6種不同極性的樹脂:HPD-400，HPD-500，HPD-600，AB-8，D101，DM130。采用靜態(tài)吸附法以天麻素的比吸附量和解吸附率為指標，優(yōu)選出AB-8吸附樹脂，上柱藥液生藥濃度為1mL含0．5g生藥，上樣量為2g/g(干樹脂:藥材)，以1～2BV/h的流速上柱循環(huán)吸附1h，徑高比1∶7，分別用2BV蒸餾水，6BV的5%乙醇以3～4BV/h的流速洗脫，棄去水洗液，收集5%乙醇洗脫液，按照此工藝天麻提取物經(jīng)大孔吸附樹脂純化后，出膏率亦從20．72%降低至5．87%。經(jīng)過測定天麻素的含量發(fā)現(xiàn)單獨使用大孔樹脂的天麻的含量為11．21%。經(jīng)3批驗證，此工藝可以穩(wěn)定地將提取物中天麻素含量純化到11．00%以上，純度不高。然后結(jié)合醇溶液調(diào)pH沉淀法對天麻大孔樹脂純化物進一步去雜質(zhì)，加95%乙醇至醇體積分數(shù)80%，靜置24h，濾過，用40%的NaOH溶液調(diào)至pH8．0，靜置24h，濾過，收集濾液，減壓濃縮，天麻提取物的出膏率為2．33%，其中天麻素的含量為23．50%，天麻總苷含量為33．52%，該工藝較傳統(tǒng)醇沉工藝大大提高提取物天麻素的含量，且工藝穩(wěn)定、可靠［23］。劉東鋒等［24］發(fā)明了一種采用ODS反相硅膠法精制天麻素的方法，具體的方法是采用體積分數(shù)70%的乙醇水溶液回流提取4次，每次提取3h，提取液回收溶劑至無醇味，過聚酰胺樹脂純化，分別用體積分數(shù)20%、40%、60%的乙醇水溶液梯度洗脫，收集40%和60%洗脫液合并、濃縮。ODS硅膠裝柱，另取ODS硅膠與濃縮液拌樣，揮干溶劑，上柱，用體積分數(shù)55%的乙腈水溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮干燥即得產(chǎn)品，從1kg天麻粉中得到純品10．1g，純度為99．3%醫(yī).學全.在.線網(wǎng)站jfsoft.net.cn。
天麻素的檢測技術(shù)
天麻素的檢測技術(shù)有高效液相色譜法、分光光度法、高效毛細管電泳、薄層色譜法和化學法，高效液相色譜法為《中國藥典》規(guī)定方法，在天麻素檢測中應用最為廣泛。高效液相色譜法2010年版《中國藥典》規(guī)定天麻素的檢測方法是高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChroma-tography，HPLC)。天麻素提取的工藝參數(shù):稀乙醇為溶劑，料液比1∶25，熱回流提取3h，放冷，稱重補足重量。色譜條件:色譜柱InertsilODS-3C18柱(5μm，150mm×4．6mm)。流動相:乙腈0．05%磷酸(3∶97)，流速1mL/min，檢測波長220nm。流動相系統(tǒng)除藥典收載的以外，還有許多類似的檢測方法及系統(tǒng)，主要有甲醇-磷酸鹽溶液-水、乙腈-水-磷酸、甲醇-水-三乙胺、甲醇-水-冰醋酸系統(tǒng)等，檢測波長多為270nm、22lnm、220nm等。也有研究報道建立了液質(zhì)技術(shù)測定天麻中天麻素含量［25］。紫外分光光度法保玉心等［26］采用紫外分光光度法(UV)在220nm波長下進行天麻素的紫外檢測，張芙蓉等［27］在223nm波長下進行天麻素的紫外檢測，該方法快速、簡便，UV法經(jīng)HPLC驗證，結(jié)果表明UV法和HPLC兩種方法測定結(jié)果之間并無顯著性差異。近紅外光譜法近紅外光譜法(Near-infraredspectroscopy，NIS)是用可見光和紅外光之間波長范圍的光譜進行分析的方法。杜偉鋒等［28］采用近紅外光譜法對不同產(chǎn)地的天麻中天麻素含量進行快速測定，以HPLC分析值作為參照，采用傅里葉變換近紅外漫反射光譜技術(shù)采集天麻的近紅外光譜，結(jié)合偏最小二乘法(PLS)建立天麻素含量的快速測定方法，該方法準確、快速、簡便，可實現(xiàn)大批量樣品的快速分析。蒙杰丹等［29］也采用近紅外光譜結(jié)合偏最小二乘法建立了同時測定通天口服液中天麻素與芍藥苷含量的方法。高效毛細管電泳法高效毛細管電泳(High-PerformaceCapillaryElectrophoresis，HPCE)是荷電粒子或離子以電場為驅(qū)動力，薄層色譜法熊慧林等［31］利用薄層色譜法(Thinlayerchromatography，TCL)鑒別天麻素，薄層板為硅膠G薄層板，展開劑為醋酸乙酯-甲醇-水(9∶1∶0．2)，顯色劑是質(zhì)量分數(shù)5%的磷鉬酸乙醇溶液，波長600nm，單波長線性掃描。王孟等［32］也采用相同的展開劑，顯色劑是質(zhì)量分數(shù)10%的磷鉬酸溶液，105℃加熱使斑點清晰，在與天麻、天麻素對照液色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，分離清晰，陰性對照無干擾�；瘜W測定法化學定性［33］是利用天麻乙醇提取液與硝酸鹽作用，加熱，溶液呈玫瑰紅，并發(fā)生黃色沉淀。也有報道使用魯米諾-過氧化氫-高錳酸鉀發(fā)光體系，對天麻素進行了定量分析［34］。
展望
天麻素有鎮(zhèn)靜、催眠、鎮(zhèn)痛、增強免疫力等作用，在治療心腦血管病、微循環(huán)系統(tǒng)疾病，頭痛眩暈等方面療效顯著。我國老齡化社會日漸形成，高血壓、高血脂群體不斷增大，為具有降壓、降脂療效的天麻素提供了巨大的市場空間。除了以上這些在天麻提取中已經(jīng)成熟應用的技術(shù)外，隨著科學技術(shù)的高速發(fā)展，越來越多的提取新技術(shù)、新方法，如超臨界流體萃取、雙水相萃取、分子蒸餾技術(shù)、膜分離技術(shù)等以后可能將會運用到天麻素提取分離研究上，將會在提高天麻制劑質(zhì)量、減少服用劑量、提高生產(chǎn)效率、降低環(huán)境污染等方面起到積極的推動作用，必將極大地推動天麻產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
作者：陳琛 李新生 周建軍 楊培君 徐頂巧 馮振斌 田惠玲 趙斌 單位：陜西理工學院 陜西省天麻山茱萸技術(shù)研究工程中心 陜西漢王藥業(yè)有限公司
