聚合酶鏈反應技術的發(fā)展和應用概述

　　聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR)，又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique)，是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統(tǒng)分子克隆技術的模式，不通過活細胞，操作簡便，在數(shù)小時內可使幾個拷貝的模板序列甚至一個DNA分子擴增10⁷～10⁸倍，大大提高了DNA的得率。因此，現(xiàn)已廣泛應用到分子生物學研究的各個領域。

　　PCR技術最早由美國Cetus公司人類遺傳研究室Kary Mullis及同事于1985年發(fā)現(xiàn)并研制成功的；最早的應用報道是Saiki等1985年將PCR技術應用于β-珠蛋白基因擴增和鐮刀狀紅細胞貧血的產(chǎn)前診斷。隨后使用了1976年Chien等分離的熱穩(wěn)定性Taq DNA聚合酶，使PCR操作大為簡化，并使PCR自動化成為可能；1987年Kary Mullis等完成了自動化操作裝置，使PCR技術進行實用階段。醫(yī)學全.在線網(wǎng).站.提供

　　國內復旦大學1988年起開始研制耐熱性多聚酶，軍事醫(yī)學科學院馬立人教授等在1989年研制成功了PCR自動裝置，并且不斷推陳出新，最近研制的PTC-51A/B型DNA熱循環(huán)儀體積小，造型美觀，價格適宜，操作簡單，尤為適宜國內應用。

　　PCR發(fā)明不到10年，卻已獲得廣泛應用。目前，每年都有上千篇文章　發(fā)表。1991年，期刊“PCR方法與應用”（PCr Methods and Application)在美國創(chuàng)刊，使有關學者有了自己的論壇和參考的專業(yè)期刊。PCR技術作為一種方法學革命，必將大大推動分子生物學各有關學科的研究，使其達到一個新的高度。

　　1993年度諾貝爾化學將已于10月13日揭曉，Kary Mullis因發(fā)明了“聚合酶鏈式反應”而獲得此殊榮�，F(xiàn)在世界各地都在使用PCR檢測病人血液中的微量遺傳物質，這一成就為精確診斷艾滋病及其它病癥鋪平了道路。瑞典皇家科學院說：“PCR方法已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)學中。該方法同DNA測序法結合起來很可能將成為研究動植物分類學的一種革新工具�！币幻�加拿大籍英國科學家Michael Smith因開創(chuàng)了“寡核苷酸基因定點誘變”的方法而與Mullis同享此榮。