1983的Warran和Marshall從慢性胃炎患者胃粘膜中培養(yǎng)出（Hp)幽門(mén)螺桿菌，并認(rèn)為Hp與慢性活動(dòng)性胃炎和消化性疾病的致病過(guò)程有關(guān)。引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛重視。我院自1987年開(kāi)始逐步深入對(duì)Hp進(jìn)行了研究，重點(diǎn)對(duì)胃部有明顯癥狀的慢性患者1362例（男922例，女440例)進(jìn)行了全而系統(tǒng)的檢查和觀察。報(bào)道如下。
1 檢測(cè)方法
1.1 涂片染色檢測(cè)
胃活檢組織直接涂片染色觀察，分別用革蘭染色，或0.1％葉啶橙，1％美藍(lán)和1％堿性復(fù)紅染色。后者染色速度最快、易觀察。Hp呈粉紅色，多數(shù)成片分布，S形，螺旋形，海鷗形或桿狀。另外組織切片，免疫鍍銀染色后，免疫熒光顯微鏡觀察。操作稍復(fù)雜，特別要注意Hp抗原性的保存，否則不易成功。此法敏感性和特異性較高。切片Warthin－Starry銀染，方便，易觀察，也是廣泛采用的一種。
1.2 電鏡對(duì)Hp的超微結(jié)構(gòu)觀察
Hp表面光滑，兩端鈍圓，有1～6根帶鞘鞭毛。菌體長(zhǎng)約1.5μm～6μm，寬6.5μm，胃竇部Hp稍長(zhǎng)，其它部位的較短，Hp呈彎曲形或S型、V型、環(huán)形、小球形及桿狀等，細(xì)菌常多個(gè)或散在分布于胃粘膜上皮微絨毛之間,Hp存在處病理主要異常為上皮微絨毛減少，消失、斷裂、部分不規(guī)則包繞菌體。
1.3 快速尿素酶試驗(yàn)
目前已有試劑盒，使用方便、快速、便宜，但特異性不強(qiáng)。Hp能產(chǎn)生大量的尿素酶，凡是產(chǎn)生尿素酶的細(xì)菌如空腸螺桿菌，變形桿菌等，都水解尿素，也呈陽(yáng)性結(jié)果。
1.4 Hp細(xì)菌培養(yǎng)
一般條件難以生長(zhǎng)，生長(zhǎng)環(huán)境要求5％O2，5％～10％CO2，85％N2，5％～10％H2，37℃3d～5d。Hp為微嗜氧菌，此菌需血瓊脂（Skirrow配方)或巧克力培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中必須加入抗生素（萬(wàn)古毒素，多粘菌素，兩性毒素B等)，以抑制其它雜菌生長(zhǎng)。菌落較小，光滑、濕潤(rùn)、半透明灰色。扁圓形，微隆起。培養(yǎng)長(zhǎng)時(shí)間可見(jiàn)溶血現(xiàn)象。能產(chǎn)生多種酶，尿素酶（＋)、觸酶（＋)、氧化酶（＋)、馬尿酸水解（－)、靛基質(zhì)（－)、H2S（＋)。
1.5 Hp血清檢測(cè)法
上述幾種方法均需通過(guò)胃鏡檢查完成。由于取材困難，又建立免疫學(xué)方法，采用血清樣本。酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA)敏感性強(qiáng)，穩(wěn)定。Hp培養(yǎng)陽(yáng)性者，發(fā)現(xiàn)所有患者血清含抗Hp抗體，IgG明顯升高，Hp抗體效價(jià)在1：320以上者，確定有Hp胃感染。補(bǔ)體固定試驗(yàn)操作繁鎖，敏感性低，應(yīng)用受限。另外血球凝集試驗(yàn)，是將Hp制成抗原，患者血清對(duì)Hp的H抗原有凝集反應(yīng)。但特異性和敏感性均較差。
1.6 C13和C14尿素的呼吸試驗(yàn)
尿素很可能是Hp生長(zhǎng)因素之一，在胃粘膜上皮細(xì)胞結(jié)合處有很高濃度尿素存在，Hp分解尿素為CO2和NH4+，而Hp感染者尿素顯著降低。據(jù)述上述原理，患者口服C13或C14標(biāo)記的尿素溶液。兒童多采用C13，1mg/kg，構(gòu)術(shù)緣酸為試，隨之每10min收集一次呼氣標(biāo)本，持續(xù)3h測(cè)定呼氣中CO2含量。此法安全可靠快速不需要胃組織活檢，13C系天然放射性同位素，可反復(fù)使用，價(jià)格便宜。因條件限制不能普及。
1.7 氣相色譜分析法
能對(duì)Hp菌體脂肪酶化學(xué)結(jié)構(gòu)中DNA的堿基（G＋C)含量進(jìn)行分析，能測(cè)定Hp菌株的屬性，在科研和臨床上都具有實(shí)際指導(dǎo)作用。
1.8 聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR)技術(shù)
PCR為近年來(lái)新開(kāi)發(fā)的一種分子生物學(xué)方面的最新試驗(yàn)，技術(shù)簡(jiǎn)單快速、可靠、敏感性高、特異性強(qiáng)。而且能準(zhǔn)確地評(píng)估治療前后Hp菌株屬型以及是否根除。另外對(duì)胃粘膜以外的Hp，如胃液、口腔、糞便中常規(guī)法不易檢出的Hp菌株也能檢出。其次PCR還可用于人群普查，觀察Hp感染并確定其來(lái)源和途徑。PCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用，對(duì)Hp流行病學(xué)、傳染病學(xué)及遺傳病學(xué)的研究方面引到重要作用。
2 Hp特性及感染情況
我院觀察了有胃部明顯癥狀的慢性患者362例，Hp陽(yáng)性1157例（84.9％)。其中慢性胃炎占Hp陽(yáng)性為81.4％。目前已被公認(rèn)Hp是慢性胃炎的病因，雖然十二指腸潰瘍病病因涉及多種因素。但“無(wú)Hp無(wú)潰瘍”的觀點(diǎn)得到更多人的肯定，我院檢查的消化性潰瘍中，Hp陽(yáng)性者為96.4％，也證明了這觀點(diǎn)。關(guān)于Hp是如何引起慢性胃炎和消化性潰瘍等病的病理機(jī)制，這是一種復(fù)雜的綜合性過(guò)程，首先Hp經(jīng)食物——口進(jìn)入人體的，在胃粘膜中為寄生創(chuàng)造理想環(huán)境，引起機(jī)體炎癥或潰瘍，是Hp進(jìn)行物理化學(xué)、免疫反應(yīng)的結(jié)果。
Hp首先產(chǎn)生大量尿素酶，迅速分解尿素為堿性氨和CO2。氨呈云霧狀包圍Hp、使胃上皮細(xì)胞表面的pH升高，為Hp可在酸性環(huán)境中生存創(chuàng)造重要條件。氨能干擾三羥酸循環(huán)，可分嗜中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的氫氯酸結(jié)合，產(chǎn)生細(xì)胞毒性產(chǎn)物，如羥胺和氯化銨。氨對(duì)胃粘膜表面電荷梯度和通透性有影響，使H+回滲。氨對(duì)胃上皮細(xì)胞有直接毒害作用，細(xì)胞損傷與氨的濃度有直接關(guān)系，即與Hp數(shù)量和菌株密切。另外生成的CO2又抑制HCO3的產(chǎn)生，增強(qiáng)胃蛋白酶對(duì)粘液的降解，因而破壞胃粘液碳酸鹽屏障，損傷胃粘膜組織。
Hp螺旋形，具有1～6條鞭毛，能在粘液中具有活躍的運(yùn)動(dòng)能力，侵入粘膜上皮細(xì)胞，破壞粘膜完整性，依靠其菌體表面菌毛樣網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定地定居于胃粘膜下和胃粘膜上皮之間。另外在胃粘膜內(nèi)含有可與Hp特異性結(jié)合的甘油脂類(lèi)受體。受體，配體之間相互作用，使定居更穩(wěn)定。Hp定居后呈克隆性生長(zhǎng)，產(chǎn)生多種物質(zhì)如脂多糖，細(xì)胞毒素和多種酶類(lèi)，導(dǎo)致炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞變性壞死。
Hp產(chǎn)生蛋白酶、脂肪酶和磷酯酶能夠隆解胃粘液的主要成分粘液糖蛋白，脂質(zhì)和脂蛋白，破壞粘膜層的完整性。Hp還產(chǎn)生蛋白溶解酶，能隆解粘分子，使粘膜層溶解成小窟穴，Hp逐漸向深部運(yùn)動(dòng)，侵入上皮細(xì)胞進(jìn)入微絨毛間隙，再向胃小凹活動(dòng)，深達(dá)腺頸部，Hp與胃粘膜分泌細(xì)胞有親和性，Hp多粘附在分泌細(xì)胞表面，而停止前進(jìn)，在此導(dǎo)致胃粘膜的損傷和炎癥產(chǎn)生。另外磷脂酶可通過(guò)磷脂的破壞和溶血卵脂的產(chǎn)生損害上皮細(xì)胞。
Hp能產(chǎn)生大量的超氧化物岐化酶和過(guò)氧化氫酶能削弱主巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞的氧化殺傷機(jī)制有抵抗作用。另外Hp能分解各種你謝產(chǎn)物與宿主胃上皮細(xì)胞作用，引起炎癥浸潤(rùn)，使細(xì)胞內(nèi)粘液消失，核極性喪失、核腫大，出現(xiàn)中性粒細(xì)胞及嗜酸粒細(xì)胞大量浸潤(rùn)。
Hp某些菌株的脂多糖含有脂質(zhì)A、與革蘭陰生細(xì)菌的內(nèi)毒素活性有關(guān)的物質(zhì)。內(nèi)毒素能夠刺激巨噬細(xì)胞釋放多細(xì)胞激肽，如白細(xì)胞介素—1和腫瘤壞死因子，引起胃部炎癥和胃粘膜變性。脂質(zhì)A還能激活補(bǔ)體引起炎癥反應(yīng)，影響胃粘膜上皮細(xì)胞的正常功能。
李德華 劉欣躍 李曉娟 溫漓潮
蘭州醫(yī)學(xué)院附屬第二院病理科（730030)
