1 試劑
1.1標(biāo)準(zhǔn)抗毒素
氣性壞疽（威氏、水腫、膿毒、溶組織)標(biāo)準(zhǔn)抗毒素由中國(guó)藥品生物制品檢定所按期分發(fā)，所標(biāo)單位應(yīng)與國(guó)際單位等值，標(biāo)準(zhǔn)抗毒素應(yīng)保存于2～8℃。
1.2毒素
由中國(guó)藥品生物制品檢定所分發(fā)。亦可自備，但其制法（包括菌種、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及干燥方法等)應(yīng)與檢定所分發(fā)者相同。試驗(yàn)用的毒素須以中國(guó)藥品生物制品檢定所分發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)抗毒素準(zhǔn)確標(biāo)定其試驗(yàn)量（見(jiàn)一覽表)，并每3個(gè)月復(fù)檢1次。使用干燥毒素時(shí)，須以精確的分析天平稱(chēng)取，每次稱(chēng)取量不得少于10mg，溶解后應(yīng)一次用完。余存之干燥毒素應(yīng)封存于裝有干燥劑之真空器皿中。亦可用干燥毒素制成液體甘油毒素，即干燥毒素生理鹽水溶解液與中性甘油（經(jīng)116℃10分鐘高壓蒸汽滅菌)等量混合，每ml至少含50個(gè)試驗(yàn)量。毒素應(yīng)保存于2～8℃暗處。
1.3稀釋液
硼酸鹽緩沖鹽水，滅菌后pH值應(yīng)為7.0～7.4。配方為：
氯化鈉8.5g
硼酸4.5g
硼砂0.5g
蒸餾水加至1000ml，過(guò)濾。
2 用具
吸管、容量瓶、注射器應(yīng)經(jīng)標(biāo)化（用雙蒸餾水稱(chēng)量法或其他準(zhǔn)確方法)。吸管、試管、容量瓶應(yīng)潔凈干燥，注射器及針頭應(yīng)煮沸消毒。
3 試驗(yàn)動(dòng)物
用體重17～19g健康小白鼠。
4 試驗(yàn)方法
4.1標(biāo)準(zhǔn)抗毒素之稀釋
用稀釋液稀釋標(biāo)準(zhǔn)抗毒素，使每ml含一覽表所示單位。標(biāo)準(zhǔn)抗毒素原液的一次吸取量不應(yīng)少于0.5ml。
4.2毒素之稀釋
用稀釋液稀釋毒素，使每ml含5個(gè)（水腫：20個(gè))毒素試驗(yàn)量，如一覽表所示。
4.3待檢抗毒素之稀釋
用稀釋液將待檢抗毒素稀釋成數(shù)個(gè)稀釋度，使每ml約含一覽表所示單位或其上下。稀釋度之間隔約為5%～10%。
4.4混合
4.4.1標(biāo)準(zhǔn)抗毒素對(duì)照組
吸取已稀釋之標(biāo)準(zhǔn)抗毒素0.9、1.0、1.1ml分別裝入小試管中，再依次分別補(bǔ)加稀釋液0.6、0.5、0.4ml（可在抗毒素之前加入)。
4.4.2待檢抗毒素試驗(yàn)組
吸取不同稀釋度之待檢抗毒素各1.0ml分別裝入小試管中，每管補(bǔ)加稀釋液0.5ml（可在抗毒素之前加入)。
以上各管分別加入稀釋毒素1.0ml（水腫：0.5ml)，混合均勻，加塞，20～25℃結(jié)合1個(gè)小時(shí)，立即注射。
混合時(shí)，吸取標(biāo)準(zhǔn)抗毒素、待檢抗毒素及毒素的吸管不得混用（若不得不用同1支吸管吸取待檢抗毒素，則應(yīng)由高稀釋度向低稀釋度依次吸取，每更換1稀釋度之前須將吸管內(nèi)的剩余液吹凈，將吸管外部所沾殘液拭凈，吸取下1稀釋度液到前次吸取的最高處，廢棄之，再于該管內(nèi)連續(xù)吸吹3次，但1支吸管只得用于1份樣品)。
4.5注射
按一覽表所示劑量與余徑，每1稀釋度注射小白鼠4只。
4.6觀察
每天上、下午各觀察試驗(yàn)動(dòng)物1次，并記錄發(fā)病及死亡情況，連續(xù)3天。
4.7結(jié)果判定
4.7.1對(duì)照動(dòng)物在3天之內(nèi)，至少是抗毒素量最少（即0.9ml)的4只中應(yīng)有2只以上死亡。以對(duì)照組動(dòng)物死亡情況比較待檢抗毒素試驗(yàn)組動(dòng)物死亡情況推算待抗毒素的效價(jià)。
4.7.2有下列情況之一者應(yīng)予重試：
（1)對(duì)照組動(dòng)物在3天之內(nèi)全部死亡或者全無(wú)死亡，jfsoft.net.cn/yaoshi/或者抗毒素量最少的4只動(dòng)物死亡不足半數(shù)，抗毒素量最多的4只動(dòng)物死亡超過(guò)半數(shù)。
（2)待檢組動(dòng)物在3天內(nèi)全部死亡或者全無(wú)死亡。
（3)動(dòng)物死亡數(shù)極不規(guī)則，以致無(wú)法進(jìn)行判定。
（4)在一稀釋度的動(dòng)物中有2只以上屬非特異死亡。
氣性壞疽抗毒素效價(jià)測(cè)定法一覽表
| 抗毒素種類(lèi) | 毒素試驗(yàn)量 | 稀釋 | 混合 | 注射 | |||||||
| 抗毒素(IU/ml) | 毒素(試驗(yàn)量/ml) | 抗毒素(ml) | 毒素(ml) | 稀釋液(ml) | 劑量(ml) | 抗毒素(IU) | 毒素(試驗(yàn)量) | 動(dòng)物只數(shù) | 途徑 | ||
| 威氏 | L+/5 | 1.0 | 5 | 1.0 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 1/5 | 1 | 4 | 靜脈 |
| 膿毒 | L+ | 5.0 | 5 | 1.0 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 1 | 1 | 4 | 靜脈 |
| 溶組織 | L+/2 | 2.5 | 5 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 1/2 | 1 | 4 | 靜脈 |
| 水腫 | L+/50 | 0.2 | 20 | 1.0 | 0.5 | 0.5 | 0.2 | 1/50 | 1jfsoft.net.cn/Article/ | 4 | 肌內(nèi) |
