TCR/CD3復合物與配體結合后,經(jīng)多種信號轉導途徑傳遞信號,最終導致T細胞活化和增殖。信號轉導中所涉及的基因根據(jù)其活化時間可以分為早早期、早期、晚期基因三種類型(表8-5)。早早期基因的轉錄不需蛋白的合成,而早期及晚期基因的轉錄則需蛋白的合成。早早期及早期基因轉錄在有絲分裂期之前,而晚期基因轉錄在有絲分裂期之后。根據(jù)活化T細胞內轉錄的基因表達蛋白功能的不同,活化T細胞基因可以分為以下三種類型:(1)細胞原癌基因;(2)細胞因子基因;(3)細胞因子受體基因。
表-8-5 活化T淋巴細胞表達的基因產(chǎn)物
名 稱 | 功能范圍 | 最早檢測mRNA的時間 | 基因產(chǎn)物存在部位 | 活化后增加倍 數(shù) |
早早期 | ||||
c-fos | 核結合蛋白 | 15min | 胞核 | <100 |
c-myc | 核結合蛋白 | 30min | 胞核 | 20 |
NF-AT | 核結合蛋白 | 20min | 胞核 | 50 |
NF-κB | 核結合蛋白 | 30min | 胞核 | >10 |
早 期 | ||||
TFN-γ | 細胞因子 | 30min | 分泌 | >100 |
IL-2 | 細胞因子 | 45min | 分泌 | >1000 |
TGF-β | 細胞因子 | ≤2hr | 分泌 | >10 |
IL-2R(p55) | 細胞因子受體 | 2hr | 漿膜 | >50 |
IL-3 | 細胞因子 | 1~2hr | 分泌 | >100 |
LT | 細胞因子 | 1~3hr | 分泌 | >100 |
IL-4 | 細胞因子 | <6hr | 分泌 | >100 |
IL-5 | 細胞因子 | <6hr | 分泌 | >100 |
IL-6 | 細胞因子 | <6hr | 分泌 | >100 |
Tf-R | 受體 | 14hr | 漿膜 | 5 |
c-myb | 細胞癌基因 | 16hr | 胞核 | 100 |
GM-CSF | 細胞因子 | <20hr | 分泌 | - |
晚 期 | ||||
HLA-DR | MHC-Ⅱ類分子 | 3~5d | 漿膜 | 10 |
VLA-1 | 粘附分子 | 7~14d | 漿膜 | - |
細胞原癌基因是一種正常細胞基因,它們的產(chǎn)物存在于細胞的不同部位,參與細胞的生長和分化,這些細胞基因研究室所以稱為細胞原癌基因,是因為這些基因的過分表達或其基因的突變形式的表達可以導致細胞惡性增生。T細胞在經(jīng)TCR/CD3介導的刺激后,幾種細胞原癌基因轉錄水平明顯升高,而且許多非淋巴細胞類型在相應配體刺激后也表達這些細胞原癌基因。這些基因中研究最多的是c-fos和c-myc,它們都屬于早早期基因范圍。c-fos和c-myc轉錄本分別在T細胞刺激15min和30min內可以檢測到,轉錄水平分別在1hr和6hr內到達最高水平,這兩種細胞原癌基因被認為是通過在細胞核內發(fā)揮作用而調節(jié)細胞生長。Fos蛋白還參與其它基因的轉錄調節(jié),包括IL-2基因。Myc蛋白可能對于DNA合成的起始是必需的,但它發(fā)揮作用的方式還不清楚。其它細胞原癌基因在T細胞活化后期階段才轉錄活化,而且需要其它基www.med126.com因的預先表達,例如c-mybjfsoft.net.cn/Article/僅在自分泌IL-2刺激T細胞后才轉錄,Myb蛋白發(fā)現(xiàn)于細胞核中,但它的功能還不清楚。
T細胞中多種細胞因子基因轉錄水平的TCR/CD3介導的刺激4hr后明顯提高。IL-2基因可以作為T細胞活化期間細胞因子基因轉錄調節(jié)的典型,IL-2對于大多數(shù)正常T細胞來說是一種自分泌生長因子,因此,其基因的轉錄調節(jié)對于T細胞活化是必需的,IL-2基因在TCR介導的正常T細胞刺激45nim-1hr內開始轉錄。細胞因子基因轉錄本RNA水平升高大部分是由于轉錄的增加,而不是由于RNA降解減少。
[AP-1]轉錄因子AP-1(activator protien-1)是由Fos(55kDa)和Jun(39kDa)組成的異二聚體,通過亮氨酸拉鏈(leucine zipper,LZ)與DNA結合。AP-1結合點又稱fo波酯(12-0-tet-radecanoyll-phordol-13-acetate,TPA)反應元件(TPa responsive element,TRE),其序列為5`-TGACTCA-3`)。TRE命名是因為TPA可通過活化PKC而誘導AP-1并與AP-1結合位點結合。
圖8-13 IL-2基因轉錄調控模式圖
IL-2基因在轉錄起始部位的5`端含有一個增強子,它僅存在T細胞中以細胞特異性的方式控制IL-2基因的轉錄,幾種結合到IL-2基因增強子區(qū)域的DNA結合蛋白被認為是MHC/Ag結合TCR與IL-2基因轉錄調節(jié)之間重要的聯(lián)系環(huán)節(jié)。這個增強子中的一些序列可以特異性地同一個稱為AP-1的轉錄激活蛋白相結合。AP-1可存在于不同細胞類型中,許多不同基因的調節(jié)區(qū)域都存在AP-1的結合。AP-1可存在于不同細胞類型中,許多不同基因的調節(jié)區(qū)域都存在AP-1的結合位點,AP-1大部分由c-jun癌基因的蛋白產(chǎn)物組成,但當它同c-fos基因的蛋白產(chǎn)物形成復合物時,其與DNA結合的親合力大大增加。Fos和Jun是通過多種亮氨酸殘基之間的疏水作用即一種“亮氨酸拉鏈”(lucinezipper)結構結合在一起的,采用某些T細胞腫瘤細胞系分析表明AP-1在IL-2基因轉錄調節(jié)中的作用是非常重要的,采用某些T細胞腫瘤細胞系分析表明AP-1在IL-2基因轉錄調節(jié)中的作用是非常重要的,這些細胞系僅在TCR介導的信號以及IL-1共同作用下才出現(xiàn)IL-2基因的轉錄。PHA刺激c-fos轉錄,IL-1刺激c-jun轉錄,因此,PHA和IL-1可以誘導AP-1核因子的出現(xiàn)(見圖8-13)。在正常T細胞中情況更加復雜,IL-2基因的轉錄可能還需要其它的核因子參與。T細胞中細胞子基因轉錄的一個明顯的特點是它們對免疫抑制藥CsA的作用非常敏感,CsA主要是通過抑制T細胞因子的產(chǎn)生起免疫抑制作用的,從而抑制T細胞生長和效應功能,IL-2基因增強子區(qū)域是CsA抑制IL-2基因轉錄的作用位點,推測CsA是干擾一種或多種轉錄激活DNA結合蛋白的功能。
IL-2R基因的轉錄是T細胞活化過程中的重要表現(xiàn),它對于T細胞自分泌生長是必需的。目前證實IL-2R由三條肽鏈組成,即α、β、γ鏈。TCR介導的T細胞刺激可以導致IL-2R亞單位p55(α鏈)表達升高。IL-2Rα基因有一個5`增強子區(qū)域,它可以同PMA誘導的核因子結合。有關IL-2Rβ、γ鏈的轉錄調節(jié)還不清楚。編碼其它細胞因子受體基因(如IL-4R)轉錄的T細胞受到刺激后也可得到激活,其轉錄調控方式類似于IL-2R基因。