細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后,可出現(xiàn)肉眼可見的凝集(agglutination)現(xiàn)象。早在1896年,Widal就利用傷寒病人的血清與傷www.med126.com寒桿菌發(fā)生特異性凝集的現(xiàn)象,有效地診斷傷寒病。至1900年Landsteriner在特異性血凝現(xiàn)象的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人類血型,并于1930年獲得了諾貝爾獎(jiǎng)金。凝集試驗(yàn)靈敏度高,方法簡便,迄今已成為通用的免疫學(xué)試驗(yàn),廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。
凝集反應(yīng)的發(fā)生分兩階段:①抗原抗體的特異結(jié)合;②出現(xiàn)可見的顆粒凝集。通常,細(xì)菌和紅細(xì)胞等顆?乖趹乙褐袔踟(fù)電荷,周圍吸引一層與之牢固結(jié)合的正離子,外面又排列一層松散的負(fù)離子層,構(gòu)成一個(gè)雙層離子云。在松散層內(nèi)界和外界之間的電位差形成Z電位。溶液中的離子強(qiáng)度愈大,Z電位也就愈大。Z電位使顆粒相互排斥。當(dāng)特異抗體與相應(yīng)抗原顆;パa(bǔ)結(jié)合時(shí),抗體的交聯(lián)作用克服了抗原顆粒表面的Z電位,而使顆粒聚集在一起。但當(dāng)抗體分子太少,不足以克服相當(dāng)厚度的離子云層時(shí),則不能使顆粒聚集。因此在凝集反應(yīng)中,IgM類抗體的作用比IgG類抗體要大數(shù)百倍,所以IgG類抗體常出現(xiàn)不完全反應(yīng),jfsoft.net.cn/zhuyuan/即不可見的抗原抗體反應(yīng)。這種抗體有時(shí)又稱不完全抗體。不完全的含義是:可與抗原牢固結(jié)合,但因其分子量較小,不能起到由橋聯(lián)作用而形成的可見凝集現(xiàn)象。在試驗(yàn)過程中,為促使凝集現(xiàn)象的出現(xiàn),可采取以下措施:增加蛋白質(zhì)或電解質(zhì),降低溶液中離子強(qiáng)度以縮短顆粒間的距離;增加試液的粘滯度,如加入右旋糖酐或葡聚糖等;用胰酶或神經(jīng)氨酸酶處理,改變細(xì)胞的表面化學(xué)結(jié)構(gòu);以離心方法克服顆粒間的排斥等。
凝集試驗(yàn)是一個(gè)定性的檢測方法,即根據(jù)凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)與否判定結(jié)果陽性或陰性;也可以進(jìn)行半定量檢測,即將標(biāo)本作一系列對倍稀釋后進(jìn)行反應(yīng),以出現(xiàn)陽性反應(yīng)的最高稀釋度作為滴度。由于凝集反應(yīng)方法簡便,敏感度高,因而在臨床檢驗(yàn)中被廣泛應(yīng)用。
在免疫學(xué)技術(shù)中,凝集反應(yīng)可分為直接凝集反應(yīng)和間接凝集反應(yīng)兩大類。自身紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)和抗球蛋白參與的凝集試驗(yàn)是兩種特殊的凝集反應(yīng)。