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執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試內(nèi)容(獸醫(yī)臨床診斷學(xué))輔導(dǎo)(3)：動(dòng)物血液常規(guī)檢驗(yàn)指導(dǎo)方法
目的和要求
掌握紅細(xì)胞及白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積容量的檢驗(yàn)操作方法及注意事項(xiàng)，所得的結(jié)果應(yīng)基本正確。
內(nèi)容和方法
一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
計(jì)算每mm8血液內(nèi)所含紅細(xì)胞數(shù)目，稱為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Redb100dcellcount，簡稱RBCcount)。其計(jì)數(shù)方法有顯微鏡計(jì)數(shù)法，光電比濁法、電子計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)法等，目前臨床多采用在試管內(nèi)稀釋血液后的顯微鏡計(jì)數(shù)法。
(一)原理
用適當(dāng)?shù)南♂屢簩⒀鹤?00倍稀釋，滴入計(jì)算室后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每mms血液內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。經(jīng)稀釋液作用雖仍保留白細(xì)胞，但對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)影響不大，因?yàn)橐话闱闆r下紅細(xì)胞與白細(xì)胞之比約為1000：1。
(二)器械和稀釋液
1.器械。器械包括以下方面。
(1)血細(xì)胞計(jì)中的計(jì)算板。常用的是改良紐巴(Neubauer)氏計(jì)算板。
(2)血細(xì)胞計(jì)中的紅細(xì)胞吸管。
(3)血蓋片。為血細(xì)胞計(jì)數(shù)專用玻片，厚度0.4mm，質(zhì)地較硬。
(4)沙利氏吸血管、2ml刻度吸管，小試管、顯微鏡(圖9-1、圖9-2)。
2.稀釋液。稀釋液主要有以下兩種。
(1)0.85％氯化鈉溶液。
(2)赫姆(Hayem)氏液。由氯化鈉1.0g，結(jié)晶硫酸鈉5.0g，氯化高汞0。5g，蒸餾水加至
200ml，溶解后過濾備用。
(三)方法
1.試管稀釋法。用2ml刻度吸管吸取紅細(xì)胞稀釋液2ml，置于小試管中。
用沙利氏吸血管10mm3(0.01m1)，擦去管外余血，輕輕吹入試管內(nèi)稀釋液底部，再吸上清液沖洗吸管3次，然后立即搖勻。
把血蓋片覆蓋于計(jì)算室上，用小玻棒沾取已混勻的紅細(xì)胞懸液一滴，輕輕接觸兩者結(jié)合處，使懸液自然流入計(jì)算室內(nèi)。靜置3min后，即可計(jì)數(shù)。
在鏡下計(jì)數(shù)時(shí)，先用低倍(10×)物鏡找到計(jì)算室中央的大方格(紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū))，然后轉(zhuǎn)用高倍(40×)物鏡，計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角的4個(gè)和中央的一個(gè)中方格，共計(jì)5個(gè)中方格(80個(gè)小方格)內(nèi)的全部紅細(xì)胞數(shù)(或用對(duì)角線的方法數(shù)5個(gè)中方格)。
為避免重復(fù)和遺漏，計(jì)數(shù)時(shí)要按一定的順序進(jìn)行。醫(yī)學(xué)全在線,搜集整,理jfsoft.net.cn并且對(duì)壓在方格左邊和上邊線上的紅細(xì)胞均計(jì)在本格內(nèi)，壓在右邊和下邊線上的紅細(xì)胞則不計(jì)在內(nèi)，此即謂“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的計(jì)數(shù)原則。
2.吸管稀釋法。用血細(xì)胞計(jì)內(nèi)的特制紅細(xì)胞吸管吸血至o.5刻度外，再吸取稀釋液至101刻度，即血液呈200倍稀釋。然后，按上述方法在計(jì)算室上充液、觀察并換算。
3.換算法。如缺乏顯微鏡等條件或大批普查時(shí)，對(duì)馬的紅細(xì)胞數(shù)可利用六五型血沉管來粗略換算。
通常是以靜置1h的紅細(xì)胞柱高的刻度數(shù)(不是血沉值)，減2乘以系數(shù)18.4萬，也可以靜置24h紅細(xì)胞柱高的刻度數(shù)乘以21.6萬，即得每mm3血液內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。
(四)注意事項(xiàng)
血細(xì)胞計(jì)數(shù)都有一定的誤差，其原因主要是儀器本身和技術(shù)操作上的缺陷，以及血細(xì)胞在計(jì)算室中分布的固有誤差。為獲得正確結(jié)果，應(yīng)注意如下幾方面的事項(xiàng)。
所有器材應(yīng)清潔、干燥，符合標(biāo)準(zhǔn)，無損壞。試劑、血液符合檢驗(yàn)要求。
吸血前混勻血液。吸稀釋液和吸血要準(zhǔn)。血柱中應(yīng)無氣泡，無血塊，同時(shí)不要吸得過多。管外壁血跡要擦凈。
充液前混勻檢液。檢液中應(yīng)無沉淀。充液要均勻，不多，不少，無氣泡。充液后不再振動(dòng)計(jì)算板。
鏡檢計(jì)數(shù)要嚴(yán)格按順序和原則進(jìn)行(計(jì)數(shù)時(shí)誤差一個(gè)細(xì)胞，計(jì)算時(shí)則要誤差一萬個(gè)細(xì)胞)，至少要計(jì)數(shù)五個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，并且各中方格之間的紅細(xì)胞最高數(shù)與最低數(shù)之差不應(yīng)超過20個(gè)。
操作要快；最好重復(fù)檢驗(yàn)2-3次，以驗(yàn)證準(zhǔn)確性。
