公開(公告)號(hào)
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CN101144077A
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公開(公告)日
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2008.03.19
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200710029673.X
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申請(qǐng)日期
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2007.08.09
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專利名稱
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一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法
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主分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I;C07K14/405(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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廣州天寶頌原生物科技開發(fā)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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夏 坤;佟順剛
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地址
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510663廣東省廣州市科學(xué)城攬?jiān)侣?0號(hào)廣州科技創(chuàng)新基地D區(qū)416房
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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劉 媖
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國(guó)省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,其特征在于它包括以下步驟: (1)將beta裂合酶基因或其同源基因克隆于表達(dá)載體中,得到beta裂合酶表達(dá)質(zhì)粒;將別藻藍(lán)蛋白類脫輔基蛋白基因或其同源基因克隆于第二個(gè)表達(dá)載體中,得到脫輔基蛋白表達(dá)質(zhì)粒;將藻藍(lán)膽素生物合成酶基因(ho1和pcyA)或其同源基因克隆于第三個(gè)表達(dá)載體中,得到藻藍(lán)膽素合成質(zhì)粒; (2)將beta裂合酶表達(dá)質(zhì);蛎撦o基蛋白表達(dá)質(zhì);蛟逅{(lán)膽素生物合成酶質(zhì)粒依次轉(zhuǎn)入配套的宿主菌;當(dāng)這些表達(dá)質(zhì)粒都轉(zhuǎn)入宿主菌后,得到相應(yīng)的工程菌,應(yīng)用此工程菌通過發(fā)酵工程能生產(chǎn)別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì);發(fā)酵后,按常規(guī)蛋白質(zhì)提純技術(shù),提純得到相應(yīng)的別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)的方法,通過應(yīng)用藻膽蛋白beta裂合酶催化藻藍(lán)膽素與別藻藍(lán)蛋白類脫輔基蛋白共價(jià)結(jié)合,制備別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì);本發(fā)明的方法應(yīng)用生物過程生產(chǎn)別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì),是一種環(huán)境友好的生產(chǎn)方法;別藻藍(lán)蛋白類熒光蛋白質(zhì)能應(yīng)用于食品、保健與醫(yī)藥功能材料領(lǐng)域,特別是應(yīng)用為生物和醫(yī)學(xué)分子檢測(cè)領(lǐng)域的熒光探針。
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國(guó)際公布
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