| 公開(公告)號 | CN1133651C |
| 公開(公告)日 | 2004.01.07 |
| 申請(專利)號 | CN99111530.9 |
| 申請日期 | 1999.08.20 |
| 專利名稱 | 蛇毒神經(jīng)生長因子的制法 |
| 主分類號 | C07K14/48 |
| 分類號 | C07K14/48 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 郝文學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 潘清;郝文學 |
| 地址 | 116600遼寧省大連開發(fā)區(qū)黃海西路148號大連司威特制藥有限公司 |
| 頒證日 | 2004.01.07 |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權項 | 蛇毒神經(jīng)生長因子的制法，其特征在于：所有操作均在10℃以下完成，①CM-SephadexC50層析取眼鏡蛇毒10g，溶于0.01M乙酸鈉緩沖液、PH5.8 100ml中，溶解后，離心10000轉(zhuǎn)，10分鐘，取上清，對上述緩沖液5000ml透析，換3次緩沖液，然后樣品上樣于用0.01M乙酸鹽緩沖液平衡好的層析柱5.5×100cm中，用0-0.7MNaCL線性梯度洗脫，收集具有神經(jīng)生長因子活性的蛋白峰，濃縮凍干，②CM-SpharoseFF層析將上述濃縮的樣品，溶于20ml0.01M乙酸鈉緩沖液PH5.8中，上樣于用0.01M乙酸鈉緩沖液PH5.8平衡好的層析柱2.6×50cm中，用0-1MNaCL線性梯度洗脫，收集具有神經(jīng)生長因子活性的蛋白峰，濃縮凍干，③SephdexG75層析將上述CM-SpharoseFF層析下的樣品，溶解在10ml10.01M乙酸鈉緩沖液，PH5.8內(nèi)含0.15MNaCL中，離心10000轉(zhuǎn)，取上清，上樣于用0.01M乙酸鈉緩沖液，PH5.8，內(nèi)含0.15MNaCL平衡好后的SephdexG75柱中，收集含有NGF活性的對稱峰，經(jīng)電泳及高效液相色譜證明為單一峰后，透析除鹽，凍干即得半成品。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及的是用蛇毒制備神經(jīng)生長因子的工藝方法，在大量實驗基礎上，優(yōu)選眼鏡蛇毒，在10℃以下條件下操作，經(jīng)CM-SepnadexC50、CM-SphatoseFF、SepndexG75三步層析，制成半成品，加入穩(wěn)定劑白蛋白和凍干制品的賦形劑右旋糖苷，過濾分裝，凍干制得。 |
| 國際公布 |
