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分泌性融合蛋白的酵母表達(dá)

公開(公告)號 CN1148452C  
公開(公告)日 2004.05.05  
申請(專利)號 CN99116862.3  
申請日期 1999.09.10  
專利名稱 分泌性融合蛋白的酵母表達(dá)  
主分類號 C12N15/62  
分類號 C12N15/62;C12N15/27;C12N15/24;C12N15/64;C12N15/81;//(C12N15/62,C12R1:84)  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 上海兆安醫(yī)學(xué)科技有限公司  
發(fā)明(設(shè)計)人 樓覺人  
地址 200021 上海市淮海中路283號香港廣場南座2005室  
頒證日 2004.05.05  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 徐迅  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種表達(dá)分泌性的粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子和白細(xì)胞介素3的融合蛋白MX的方法,其特征在于,該方法包括:(a)將粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子的編碼序列和白細(xì)胞介素3的編碼序列融合在一起,形成編碼融合蛋白MX的多核苷酸序列,所述的多核苷酸序列編碼基酸序列如SEQ ID NO:2所示的融合蛋白;(b)將步驟(a)中編碼融合蛋白MX的多核苷酸序列插入到表達(dá)載體,形成含有融合蛋白MX編碼序列的表達(dá)載體;(c)將步驟(b)中含有融合蛋白MX編碼序列的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入巴斯德畢赤酵母細(xì)胞;(d)篩選出MX編碼序列整合入基因組的轉(zhuǎn)化的巴斯德畢赤酵母細(xì)胞;(e)在適合編碼MX融合蛋白的條件下,培養(yǎng)步驟(d)中轉(zhuǎn)化的巴斯德畢赤酵母細(xì)胞;(f)分離出MX融合蛋白。  
摘要 本發(fā)明涉及在酵母中表達(dá)分泌性的粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和白細(xì)胞介素3(IL-3)的融合蛋白(簡稱為“MX融合蛋白”)的方法,還涉及生產(chǎn)該融合蛋白的工程菌和所生產(chǎn)的融合蛋白MX。本發(fā)明的MX融合蛋白基因十分穩(wěn)定,可調(diào)控表達(dá),且產(chǎn)物為天然氨基酸蛋白序列,無置換突變。  
國際公布  
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