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分泌人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)的大腸桿菌菌株

公開(公告)號 CN1156575C  
公開(公告)日 2004.07.07  
申請(專利)號 CN01800753.8  
申請日期 2001.03.31  
專利名稱 分泌人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)的大腸桿菌菌株  
主分類號 C12N15/70  
分類號 C12N15/70;C12N1/21;C07K14/535  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2000.3.31 KR 2000/17052  
申請(專利權(quán))人 韓國科學(xué)技術(shù)院  
發(fā)明(設(shè)計)人 李相燁;丁基峻  
地址 韓國大田廣域市  
頒證日 2004.07.07  
國際申請 PCT/KR2001/000549 2001.3.31  
進入國家日期 2001.11.30  
專利代理機構(gòu) 中原信達知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 丁業(yè)平;王維玉  
國省代碼 韓國;KR  
主權(quán)項 重組質(zhì)粒載體,包括:卡那霉素抗性基因;啟動子;木聚糖內(nèi)切酶信號序列;編碼SEQ ID NO:1的寡肽的核苷酸序列;和人粒細胞集落刺激因子(hG-CSF)基因。  
摘要 本發(fā)明提供了含有卡那霉素抗性基因、啟動子、木聚糖內(nèi)切酶信號序列、編碼由含6個連續(xù)組酸殘基的13個氨基酸組成的寡肽的核苷酸序列和人粒細胞集落刺激因子(hG-CSF)基因的重組質(zhì)粒載體;以及用所述載體轉(zhuǎn)化的大腸桿菌;以及以高純度從所述微生物分泌的蛋白庫中生產(chǎn)完整hG-CSF蛋白的方法。根據(jù)本發(fā)明,通過促進大量hG-CSF融合蛋白分泌到周質(zhì)中的相當簡單的方法可以高純度制備hG-CSF蛋白,所述方法不需要復(fù)雜的加工過程例如對于通過常規(guī)技術(shù)分離胞質(zhì)中產(chǎn)生的作為不溶性包函體的hG-CSF所需的溶解和隨后再折疊,因此,在開發(fā)用于抗癌治療的補充藥物的過程中可用hG-CSF蛋白廣泛地作為活性成分。  
國際公布 WO2001/073081 英 2001.10.4  
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