公開(公告)號
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CN1156575C
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公開(公告)日
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2004.07.07
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申請(專利)號
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CN01800753.8
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申請日期
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2001.03.31
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專利名稱
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分泌人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)的大腸桿菌菌株
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主分類號
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C12N15/70
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分類號
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C12N15/70;C12N1/21;C07K14/535
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2000.3.31 KR 2000/17052
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申請(專利權(quán))人
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韓國科學(xué)技術(shù)院
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發(fā)明(設(shè)計)人
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李相燁;丁基峻
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地址
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韓國大田廣域市
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頒證日
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2004.07.07
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國際申請
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PCT/KR2001/000549 2001.3.31
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進入國家日期
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2001.11.30
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專利代理機構(gòu)
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中原信達知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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丁業(yè)平;王維玉
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國省代碼
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韓國;KR
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主權(quán)項
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重組質(zhì)粒載體,包括:卡那霉素抗性基因;啟動子;木聚糖內(nèi)切酶信號序列;編碼SEQ ID NO:1的寡肽的核苷酸序列;和人粒細胞集落刺激因子(hG-CSF)基因。
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摘要
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本發(fā)明提供了含有卡那霉素抗性基因、啟動子、木聚糖內(nèi)切酶信號序列、編碼由含6個連續(xù)組氨酸殘基的13個氨基酸組成的寡肽的核苷酸序列和人粒細胞集落刺激因子(hG-CSF)基因的重組質(zhì)粒載體;以及用所述載體轉(zhuǎn)化的大腸桿菌;以及以高純度從所述微生物分泌的蛋白庫中生產(chǎn)完整hG-CSF蛋白的方法。根據(jù)本發(fā)明,通過促進大量hG-CSF融合蛋白分泌到周質(zhì)中的相當簡單的方法可以高純度制備hG-CSF蛋白,所述方法不需要復(fù)雜的加工過程例如對于通過常規(guī)技術(shù)分離胞質(zhì)中產(chǎn)生的作為不溶性包函體的hG-CSF所需的溶解和隨后再折疊,因此,在開發(fā)用于抗癌治療的補充藥物的過程中可用hG-CSF蛋白廣泛地作為活性成分。
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國際公布
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WO2001/073081 英 2001.10.4
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