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中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1蛋白

公開(公告)號(hào) CN1526737A  
公開(公告)日 2004.09.08  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03158299.0  
申請(qǐng)日期 2003.09.23  
專利名稱 中華絨螯蛻皮抑制激素1蛋白  
主分類號(hào) C07K19/00  
分類號(hào) C07K19/00;C07K16/18;A61K38/16;A61K48/00;A61P43/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 南京師范大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 周開亞;宋霞;馬長艷;郭豫杰  
地址 210097江蘇省南京市寧海路122號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京知識(shí)律師事務(wù)所  
代理人 胡錫瑜  
國省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1基因克隆制備的融合蛋白,其特征是以中華絨螯蟹蛻皮抑制激素1基因?qū)?yīng)于外顯子的核苷酸序列與質(zhì)粒pGEX-4T-1制備成GST-Ers-MIH 1-pGEX-4T-1表達(dá)質(zhì)粒,在無NaCL的LB中30~35℃培養(yǎng)到OD600為0.5,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),破碎細(xì)胞后經(jīng)GST親和層析柱純化,得到純化的融合蛋白。該融合蛋白是Ers-MIH 1基因外顯子編碼的基酸,序列為:Met Val Ser Arg Ala Gln Ser Arg Phe Ser Ser Gln Arg Thr Trp Leu Val Ala Ala Val1 6 11 16Val Leu Ala Val Leu Cys Ser Phe Gly Val Gln Arg Ala Ala Ala Gly Ile Ile Asn Ala21 26 31 36Glu Cys Pro Asn Met Ile Gly Asn Arg Asp Ile Tyr Lys Lys Val Asp Trp Ile Cys Glu41 46 51 56Asp Cys Ala Asn Ile Phe Arg Ile Asp Gly Leu Gly Met Leu Cys Arg Lys Asn Cys Phe61 66 71 76Arg Asn Ile Asp Phe Leu Trp Cys Val Tyr Ala Ser Glu Arg His Ala Gln Lys Asp Asp81 86 91 96Leu Thr Arg Tyr Val Ser Ile Leu Gly Gln101 106  
摘要 本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域,所述的中華絨螯蟹(Eriocheir japonica sinensis)蛻皮抑制激素1(Ers-MIH 1)基因長度為3 506 bp,包括3個(gè)外顯子、2個(gè)內(nèi)含子、412 bp的5′端上游調(diào)控區(qū)和917 bp的3′端UTR。根據(jù)Ers-MIH 1基因序列推導(dǎo)的多肽由75個(gè)氨基酸的成熟肽和35個(gè)氨基酸的信號(hào)肽組成。該成熟肽具有抑制中華絨螯蟹蛻皮的功能,從而對(duì)中華絨螯蟹的生長起重要的調(diào)控作用。Ers-MIH 1基因的GenBank檢索號(hào)為AY310313。本發(fā)明利用Ers-MIH 1基因克隆制備融合蛋白,并利用該蛋白免疫動(dòng)物制備多克隆抗體,同時(shí)將該抗體或該基因表達(dá)的控制用于解決養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)的因蛻皮異常而致個(gè)體偏小的問題。  
國際公布  
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