| 公開(公告)號 | CN1169836C |
| 公開(公告)日 | 2004.10.06 |
| 申請(專利)號 | CN02115705.7 |
| 申請日期 | 2002.04.11 |
| 專利名稱 | 液-固萃取體系分離純化血紅蛋白的方法 |
| 主分類號 | C07K14/805 |
| 分類號 | C07K14/805;C07K1/14 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中南民族大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 李步海;孫小梅;沈靜茹;雷灼霖 |
| 地址 | 430074 湖北省武漢市民院路5號中南民族大學(xué)科研處 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 武漢開元專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 王和平 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權(quán)項 | 一種液-固萃取體系分離純化血紅蛋白的方法，包括如下步驟：(1)、在具塞比色管中，加入硫酸銨或磷酸鉀，pH控制在3.0～9.0，加入成相聚合物吐溫80溶液和聚乙二醇(PEG)8000或聚乙二醇(PEG)6000與亞胺基二乙酸(IDA)組成的修飾物溶液，然后加入血樣，用二次水定容，置于康氏電動震蕩機上，平置振蕩2-10分鐘，取下倒置10-20分鐘，體系分成聚合物固相和鹽水液相，血紅蛋白被萃入固相；(2)、在上述固相加二次水溶解后，加入乙二胺四乙酸和硫酸銨或磷酸鉀，置于康氏電動震蕩機上，平置振蕩2-10分鐘，取下倒置10-20分鐘，體系分成聚合物固相和鹽水液相，血紅蛋白被反萃入液相；(3)、將上述萃入液相的血紅蛋白置于透析袋中進行透析，小分子的鹽、少量聚合物可以通過透析袋，而留在透析袋中血紅蛋白大分子，其純度可達(dá)到99％以上。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種用液-固萃取體系從血液中分離純化血紅蛋白的方法。本發(fā)明方法所需設(shè)備簡單，分離純化成本低，速度快，成相容易，成相后直接傾出液相即可使液固兩相分離，無須雙水相萃取中的離心等操作，不用有機溶劑，無毒性，成相聚合物及鹽對蛋白質(zhì)有穩(wěn)定和保護作用。萃取分離選擇性好，萃取容量大，是易于規(guī)模放大分離純化血紅蛋白的新技術(shù)。本發(fā)明用PEG修飾物混合聚合物-鹽-水液-固萃取體系對豬血、牛血、人血中血紅蛋白進行萃取，經(jīng)過一次萃取，一次反萃和透析即可得到純度大于99％的血紅蛋白的水溶液。 |
| 國際公布 |
