公開(公告)號
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CN1546668A
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公開(公告)日
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2004.11.17
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申請(專利)號
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CN200310107316.2
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申請日期
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2003.12.12
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專利名稱
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乙型肝炎病毒X蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)表達(dá)載體及其構(gòu)建
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主分類號
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C12N15/63
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分類號
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C12N15/63;C12N15/51;C12N15/62;C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南開大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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張曉東;葉麗虹;東楠;王洪輝
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地址
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300071天津市衛(wèi)津路94號(南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院分子生物研究所張曉東)
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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天津市學(xué)苑有限責(zé)任專利代理事務(wù)所
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代理人
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解松凡
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國省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種乙型肝炎病毒X蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)表達(dá)載體,包括:pTAT-GFP載體,其特征是所述pTAT-GFP載體與人乙型肝炎病毒X基因重組,它的核苷酸序列如SEQIDNo.1所述,表達(dá)含有HBx的融合蛋白。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種乙型肝炎病毒X蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)表達(dá)載體及其構(gòu)建,是通過人乙肝病毒的X基因與pTAT-GFP載體構(gòu)建重組質(zhì)粒pTAT-GFP-X,構(gòu)建的pTAT-GFP-X重組質(zhì)?杀磉_(dá)含有乙型肝炎病毒X蛋白的融合蛋白;經(jīng)異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)可大量表達(dá)融合蛋白;可以通過6組氨酸(His6)進(jìn)行純化;TAT多肽具有能夠穿過細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),利用該功能本發(fā)明可以使HBx蛋白導(dǎo)入細(xì)胞;本發(fā)明將HBx蛋白導(dǎo)入細(xì)胞后,可通過GFP檢測導(dǎo)入效率和胞內(nèi)示蹤;本發(fā)明在進(jìn)行蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),可實(shí)現(xiàn)HBx蛋白的“定量”導(dǎo)入,本發(fā)明可詳細(xì)地研究乙肝病毒X蛋白的致病作用。
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國際公布
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