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一種聯(lián)合缺失19Kda、55KDAE1B編碼序列重組腺病毒構(gòu)建體的構(gòu)建及用途

公開(公告)號 CN1184310C  
公開(公告)日 2005.01.12  
申請(專利)號 CN01144629.3  
申請日期 2001.12.21  
專利名稱 一種聯(lián)合缺失19Kda、55KDA E1B編碼序列重組腺病毒構(gòu)建體的構(gòu)建及用途  
主分類號 C12N7/01  
分類號 C12N7/01;C12N15/861;A61K48/00;A61P35/00;//C12N701,C12R1∶93  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 深圳市天達(dá)康基因工程有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 周劍鋒;馬丁;盧運(yùn)萍;王世宣  
地址 518057 廣東省深圳市高新區(qū)南區(qū)市高新技術(shù)工業(yè)村R3棟B座710室  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人類5型腺病毒構(gòu)建體,其特征在于該重組病毒構(gòu)建體缺失了E1B蛋白的編碼區(qū)1713nt-3328nt,19kDa、55kDaE1B蛋白編碼功能喪失,除此之外,包含人類5型腺病毒全部基因組序列。  
摘要 本發(fā)明公開了一種在人類5型腺病毒(Human adenovirus type 5)的基因組中定點(diǎn)缺失(delete)19kDa E1B、55kDa E1B編碼序列的構(gòu)建方案,以及獲得的重組腺病毒構(gòu)建體在腫瘤治療、診斷中的具體用途。用PCR擴(kuò)增、酶切、連接、亞克隆、轉(zhuǎn)染、重組腺病毒單克隆純化等技術(shù),缺失19kDa E1B的編碼區(qū)(1713-2243nt)和E1B55kDa(2018-3328nt)序列,篩選出不能表達(dá)19kDa E1B與E1B 55kDa功能蛋白的重組腺病毒構(gòu)建體。該構(gòu)建體能選擇性地在攜帶p53基因突變表型的腫瘤細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,從而特異性裂解殺滅腫瘤細(xì)胞,但對正常細(xì)胞卻無毒性效應(yīng)。該重組腺病毒構(gòu)建體在用于腫瘤治療藥物、診斷試劑的制備中具有良好的實(shí)用價值,同時也是一種良好的基因治療載體。  
國際公布  
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