| 公開(公告)號 | CN1189561C |
| 公開(公告)日 | 2005.02.16 |
| 申請(專利)號 | CN02134572.4 |
| 申請日期 | 2002.08.19 |
| 專利名稱 | 發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法 |
| 主分類號 | C12N9/82 |
| 分類號 | C12N9/82;C12N1/20 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 廣州市微生物研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 梁淑娃;彭中健;楊冠東;杜少平 |
| 地址 | 510250 廣東省廣州市寶崗大道荔福路68號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州粵高專利代理有限公司 |
| 代理人 | 何燕玲 |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法，包括平板培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)，其特征在于：(1)平板培養(yǎng)：將凍干的大腸桿菌菌種用水溶解后，涂布至凝固有培養(yǎng)基的平皿上于36-40℃培養(yǎng)10-36小時；(2)種子罐培養(yǎng)：將(1)中已長好的平皿菌種接入種子罐中，在36-40℃，轉(zhuǎn)速250-500轉(zhuǎn)/分，風(fēng)量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分的條件下，培養(yǎng)10-16小時；(3)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將(2)中已培養(yǎng)好的種子罐菌種接入發(fā)酵罐中，接種量為10-30％，在36-40℃，轉(zhuǎn)速180-350轉(zhuǎn)/分，風(fēng)量1∶0.3-1∶1.2體積/體積/分，pH6.5-7.5的條件下，培養(yǎng)10-16小時；其中平板培養(yǎng)所用培養(yǎng)基的組分及重量百分含量為：牛肉膏2-6％、NaCl0.1-2％、瓊脂0.5-2.5％，pH6.5-7.5；其中種子罐和發(fā)酵罐培養(yǎng)所用的液體培養(yǎng)基的組分及重量百分含量為：牛肉膏2-6％、玉米漿0.5-4％、酵母粉0.5-2.5％、味精1-3％，pH6.5-7.5。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，提供了一種發(fā)酵生產(chǎn)門冬酰胺酶的方法。以大腸桿菌為出發(fā)菌進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)，在適合的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，能使門冬酰胺酶獲得高效表達(dá)，產(chǎn)酶單位為50-80單位/毫升。使用本發(fā)明的方法生產(chǎn)門冬酰胺酶針劑，原材料成本大大降低。 |
| 國際公布 |
