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細(xì)小病毒B19的診斷測(cè)試

公開(公告)號(hào) CN1636071A  
公開(公告)日 2005.07.06  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02812816.8  
申請(qǐng)日期 2002.06.28  
專利名稱 細(xì)小病毒B19的診斷測(cè)試  
主分類號(hào) C12Q1/70  
分類號(hào) C12Q1/70  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.6.28 US 60/302,077;2002.3.19 US 60/365,956;2002.3.29 US 60/369,224  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 希龍公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 S·皮謝安特斯;V·夏瑪拉  
地址 美國(guó)加利福尼亞州  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/US2002/020684 2002.6.28  
進(jìn)入國(guó)家日期 2003.12.26  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司  
代理人 徐迅  
國(guó)省代碼 美國(guó);US  
主權(quán)項(xiàng) 一種檢測(cè)生物學(xué)樣品中人細(xì)小病毒B19感染的方法,其特征在于,該方法包括:(a)分離懷疑含有人細(xì)小病毒B19DNA的生物學(xué)樣品中的核酸,其中,所述核酸含有RNA靶序列;(b)使分離得到的細(xì)小病毒B19核酸與第一寡核苷酸反應(yīng),該第一寡核苷酸含有第一引物,該第一引物含有與所述RNA靶序列的3′末端部分充分互補(bǔ)而能與其復(fù)合的復(fù)合序列,其中,所述第一引物還含有DNA依賴性RNA聚合酶5′的啟動(dòng)子,該啟動(dòng)子操作性連接于所述復(fù)合序列,所述反應(yīng)在能形成寡核苷酸/靶序列復(fù)合物和啟動(dòng)DNA合成的條件下進(jìn)行;(c)以所述RNA靶序列為模板,在延伸反應(yīng)中使所述第一引物延伸,產(chǎn)生與所述RNA靶序列互補(bǔ)的第一DNA引物延伸產(chǎn)物;(d)用能選擇性降解所述RNA靶序列的酶將所述第一DNA引物延伸產(chǎn)物從所述RNA靶序列中分離;(e)在形成寡核苷酸/靶序列復(fù)合物和啟動(dòng)DNA合成的條件下,用第二寡核苷酸處理所述DNA引物延伸產(chǎn)物,所述第二寡核苷酸含有第二引物,該第二引物含有與所述DNA引物延伸產(chǎn)物的3′末端部分充分互補(bǔ)而能與其復(fù)合的復(fù)合序列;(f)在DNA延伸反應(yīng)中延伸所述第二引物的3′末端,產(chǎn)生第二DNA引物延伸產(chǎn)物,從而產(chǎn)生DNA依賴性RNA聚合酶的模板;(g)利用所述模板和能識(shí)別所述啟動(dòng)子序列的DNA依賴性RNA聚合酶產(chǎn)生所述靶序列的多個(gè)RNA拷貝;和(h)使用步驟(g)的RNA拷貝,自身催化性地重復(fù)步驟(b)到步驟(g),以擴(kuò)增所述靶序列。  
摘要 本發(fā)明公開了衍生自細(xì)小病毒B19基因組保守區(qū)的人細(xì)小病毒B19引物和探針。還公開了采用所述引物和探針的核酸試驗(yàn)。  
國(guó)際公布 WO2003/002753 英 2003.1.9  
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