公開(公告)號
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CN1212400C
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公開(公告)日
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2005.07.27
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申請(專利)號
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CN01145166.1
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申請日期
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2001.12.31
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專利名稱
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用于生產(chǎn)口蹄疫疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法
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主分類號
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C12N15/33
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分類號
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C12N15/33;C12N15/82;C12N15/90;A01H1/00;A61K39/12;A61P31/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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甘肅亞盛集團(tuán);中國科學(xué)院遺傳研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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周長生;陳正華;杜若甫;胡贊民;;石銳
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地址
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730030 甘肅省蘭州市張掖路219號基隆大廈21層
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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李悅
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國省代碼
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甘肅;62
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主權(quán)項
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一種用于生產(chǎn)O型口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法,包括以下步驟:(1)構(gòu)建用于向油菜葉綠體中定點轉(zhuǎn)化外源基因的油菜葉綠體相關(guān)DNA序列;(2)合成編碼O型口蹄疫多肽疫苗的基因序列,使該序列與報告基因或具有強(qiáng)免疫源性蛋白的基因串聯(lián)得到融合的O型口蹄疫多肽疫苗基因,所述編碼O型口蹄疫多肽疫苗的基因序列由SEQIDNO:3或SEQIDNO:4所示;(3)將步驟(1)構(gòu)建出來的DNA序列與步驟(2)合成的融合的O型口蹄疫多肽疫苗基因重組,使融合的疫苗基因序列位于油菜葉綠體相關(guān)DNA序列的中間;(4)將步驟(3)中重組得到的DNA片段插入到克隆載體的多克隆位點上,作為O型口蹄疫多肽疫苗基因油菜葉綠體定點轉(zhuǎn)化載體;和(5)用步驟(4)得到的轉(zhuǎn)化載體轉(zhuǎn)化油菜,獲得葉綠體表達(dá)O型口蹄疫多肽疫苗的轉(zhuǎn)基因植物。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種用于生產(chǎn)口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法。方法包括:克隆油菜葉綠體基因組同源重組片段SEQ IDNO:1所示序列,以及SEQ ID:2所示序列,并用這兩個DNA片段構(gòu)建油菜葉綠體定點轉(zhuǎn)化載體,在載體上這兩個片段之間,插有口蹄疫多肽疫苗基因(即SEQ ID NO:3及SEQ ID NO:4所示序列)與綠色熒光蛋白或其它報告基因串聯(lián)而得的融合疫苗基因。并將融合基因插入一種克隆載體中。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù),使該基因的同源重組序列與油菜葉綠體發(fā)生定點整合。再經(jīng)對油菜細(xì)胞的篩選與植株誘導(dǎo)與培育,最終獲得表達(dá)口蹄疫多肽疫苗的油菜葉綠體轉(zhuǎn)基因植物。
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國際公布
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