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利用大腸桿菌OmpF胞外生產(chǎn)靶蛋白的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1250729C  
公開(kāi)(公告)日 2006.04.12  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02802738.8  
申請(qǐng)日期 2002.08.13  
專利名稱 利用大腸桿菌OmpF胞外生產(chǎn)靶蛋白的方法  
主分類號(hào) C12N15/70(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/70(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.8.14 KR 2001/48881  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 韓國(guó)科學(xué)技術(shù)院  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李相燁;丁基峻  
地址 韓國(guó)大田廣域市  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) 2002-08-13 PCT/KR2002/001547  
進(jìn)入國(guó)家日期 2003.04.23  
專利代理機(jī)構(gòu) 中原信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司  
代理人 丁業(yè)平;王維玉  
國(guó)省代碼 韓國(guó);KR  
主權(quán)項(xiàng) 一種表達(dá)載體pOmpF6,其包括青霉素抗性基因、OmpF啟動(dòng)子以及OmpF基因,其基因圖譜如圖2表示。  
摘要 本發(fā)明提供包含編碼大腸桿菌OmpF蛋白基因的表達(dá)載體、轉(zhuǎn)化有該表達(dá)載體的大腸桿菌以及采用該微生物胞外生產(chǎn)靶蛋白的方法。本發(fā)明的重組表達(dá)載體含有氨芐青霉素抗性基因、OmpF啟動(dòng)子以及OmpF基因。根據(jù)本發(fā)明,靶蛋白可以通過(guò)比常規(guī)方法更簡(jiǎn)單的方法進(jìn)行胞外生產(chǎn),其意義在于:由于采用OmpF啟動(dòng)子進(jìn)行組成型表達(dá),因此OmpF融合蛋白的分泌性生產(chǎn)與細(xì)胞生長(zhǎng)同時(shí)開(kāi)始,并且隨著細(xì)胞濃度增加,蛋白分泌性生產(chǎn)的量也持續(xù)增加。所以,通過(guò)細(xì)胞的高密度培養(yǎng)可大量生產(chǎn)靶蛋白。  
國(guó)際公布 2003-02-27 WO2003/016538 英  
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