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分離腸膽固醇結(jié)合蛋白的方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1330667C  
公開(kāi)(公告)日 2007.08.08  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03817332.8  
申請(qǐng)日期 2003.07.28  
專利名稱 分離腸膽固醇結(jié)合蛋白的方法  
主分類號(hào) C07K14/47(2006.01)I  
分類號(hào) C07K14/47(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P9/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2002.8.6 EP 02017504.8  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 塞諾菲-安萬(wàn)特德國(guó)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 W·克拉默;W·弗里克  
地址 德國(guó)法蘭克福  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) 2003-07-28 PCT/EP2003/008290  
進(jìn)入國(guó)家日期 2005.01.20  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京市中咨律師事務(wù)所  
代理人 黃革生;隋曉平  
國(guó)省代碼 德國(guó);DE  
主權(quán)項(xiàng) 可通過(guò)下述方法獲得的純化的145kDa的蛋白,該方法包括:a]提供腸細(xì)胞,b]將來(lái)自a]的腸細(xì)胞與光敏的化合物2-氮雜環(huán)丁烷酮共同孵育,所述2-氮雜環(huán)丁烷酮被放射標(biāo)記并且能夠與所述蛋白特異性結(jié)合,c]將所述腸細(xì)胞溶解并去除細(xì)胞碎片,d]將上清液加至含有小麥胚芽凝集素瓊脂糖的裝置上,e]將來(lái)自d]的小麥胚芽凝集素瓊脂糖的洗脫液上樣于羥基磷灰石柱上,f]將來(lái)自e]的放射標(biāo)記部分上樣于制備性SDS-PAGE上,g]收集放射標(biāo)記部分且可能沉淀;或者所述方法包括:a]制備腸細(xì)胞,b]將來(lái)自a]的腸細(xì)胞與光敏的膽固醇吸收抑制劑共同孵育,所述膽固醇吸收抑制劑被放射標(biāo)記或生物素標(biāo)記,c]將來(lái)自b]的腸細(xì)胞溶解并去除細(xì)胞碎片,d]將上清液置于鏈霉抗生物素-瓊脂糖上,e]將洗脫液置于SDS-PAGE上,f]分離、洗脫并且可能再折疊的大小為140-150kDa的蛋白。  
摘要 本發(fā)明描述了分離能夠結(jié)合膽固醇和/或膽固醇吸收抑制劑的腸蛋白的方法。  
國(guó)際公布 2004-02-19 WO2004/014947 英  
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