| 公開(公告)號 | CN1245510C |
| 公開(公告)日 | 2006.03.15 |
| 申請(專利)號 | CN03151203.8 |
| 申請日期 | 2003.09.25 |
| 專利名稱 | 長效重組組織因子途徑抑制物及其制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/12(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 馬 端;宋后燕;白 浩;張 農(nóng) |
| 地址 | 200433上海市邯鄲路220號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 包兆宜 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種重組組織因子途徑抑制物長效突變體，其氨基酸序列是將野生型組織因子途徑抑制物的282位賴氨酸替換為丙氨酸后得到的序列。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及長效組織因子途徑抑制物(LTFPI)及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明對組織因子途徑抑制物(TFPI)及其受體低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(LRP)的生物信息學(xué)和結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)分析和實驗，確定了TFPI羧基末端與LRP結(jié)合并被清除的部位。設(shè)計了TFPI羧基末端突變體，通過PCR定點突變構(gòu)建LTFPI基因后，與原核或真核表達(dá)載體重組，轉(zhuǎn)化大腸桿菌或畢赤酵母，篩選高表達(dá)工程菌。原核工程菌經(jīng)發(fā)酵擴(kuò)增，破碎細(xì)菌，離心收集包涵體，復(fù)性后經(jīng)分子篩和離子交換二步法純化LTFPI；真核工程菌直接將上清進(jìn)行二步純化。獲得的LTFPI半衰期明顯延長，具有良好的抗凝功能。 |
| 國際公布 |
