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一種重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生產(chǎn)方法

公開(公告)號(hào) CN1766107A  
公開(公告)日 2006.05.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510085496.8  
申請(qǐng)日期 2005.07.22  
專利名稱 一種重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生產(chǎn)方法  
主分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61K38/18(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 成都芝田生物工程有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 趙 波  
地址 610041四川省成都市高新區(qū)博士創(chuàng)業(yè)園  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所  
代理人 王 為;涂榮昌  
國(guó)省代碼 四川;51  
主權(quán)項(xiàng) 一種人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的制備辦法,包括以下步驟: a.人工合成人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因; b.步驟a得到的基因與適宜的表達(dá)載體上的GST蛋白基因3′端融合,中間含腸激酶或者凝血酶識(shí)別位點(diǎn); c.將含有融合蛋白編碼基因的適宜的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化適宜的大腸桿菌獲得基因工程菌; d.該基因工程菌經(jīng)發(fā)酵后,經(jīng)提取層析純化步驟,制備出GST-KGF融合蛋白; e.再經(jīng)腸激酶或者凝血酶切割后,分離純化獲得重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。  
摘要 本發(fā)明涉及一種重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生產(chǎn)方法,特別涉及一種利用基因重組技術(shù)制備人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生物活性多肽的方法,該方法包括以下步驟:a.人工合成人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子氨基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因;b.步驟a得到的基因與適宜的表達(dá)載體上的谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶蛋白基因3′端融合,該基因中間部分含凝血酶或者腸激酶識(shí)別位點(diǎn);c.將含有融合蛋白編碼基因的適宜的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化適宜的大腸桿菌獲得基因工程菌;d.該基因工程菌經(jīng)發(fā)酵后,經(jīng)提取層析純化步驟,制備出GST-KGF融合蛋白;e.再經(jīng)凝血酶或者腸激酶切割后,分離純化獲得重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。  
國(guó)際公布  
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