公開(公告)號(hào)
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CN1766107A
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公開(公告)日
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2006.05.03
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200510085496.8
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申請(qǐng)日期
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2005.07.22
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專利名稱
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一種重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生產(chǎn)方法
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主分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;A61K38/18(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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成都芝田生物工程有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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趙 波
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地址
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610041四川省成都市高新區(qū)博士創(chuàng)業(yè)園
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所
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代理人
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王 為;涂榮昌
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國(guó)省代碼
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四川;51
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主權(quán)項(xiàng)
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一種人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的制備辦法,包括以下步驟: a.人工合成人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子氨基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因; b.步驟a得到的基因與適宜的表達(dá)載體上的GST蛋白基因3′端融合,中間含腸激酶或者凝血酶識(shí)別位點(diǎn); c.將含有融合蛋白編碼基因的適宜的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化適宜的大腸桿菌獲得基因工程菌; d.該基因工程菌經(jīng)發(fā)酵后,經(jīng)提取層析純化步驟,制備出GST-KGF融合蛋白; e.再經(jīng)腸激酶或者凝血酶切割后,分離純化獲得重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生產(chǎn)方法,特別涉及一種利用基因重組技術(shù)制備人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子的生物活性多肽的方法,該方法包括以下步驟:a.人工合成人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子氨基酸編碼區(qū)相對(duì)應(yīng)的基因;b.步驟a得到的基因與適宜的表達(dá)載體上的谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶蛋白基因3′端融合,該基因中間部分含凝血酶或者腸激酶識(shí)別位點(diǎn);c.將含有融合蛋白編碼基因的適宜的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化適宜的大腸桿菌獲得基因工程菌;d.該基因工程菌經(jīng)發(fā)酵后,經(jīng)提取層析純化步驟,制備出GST-KGF融合蛋白;e.再經(jīng)凝血酶或者腸激酶切割后,分離純化獲得重組人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。
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國(guó)際公布
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