公開(公告)號
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CN1282750C
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公開(公告)日
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2006.11.01
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申請(專利)號
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CN200510060040.6
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申請日期
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2005.03.25
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專利名稱
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WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒及檢測方法
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主分類號
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C12Q1/68(2006.01)I
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分類號
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C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/25(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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舟山市疾病預(yù)防控制中心;杭州博康生物科技有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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王忠發(fā);邵俊斌;王建躍;沃健兒;何偉賢;薛 憶
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地址
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316000浙江省舟山市定海區(qū)解放西路231號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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舟山固浚專利事務(wù)所
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代理人
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范榮新
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項
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一種WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒,有試劑容器,其特征是其中有包裝下列試劑的試劑容器: TaqMan Buffer液; 特異性引物-1; 特異性引物-2; 特異性TaqMan探針; 其中, 特異性引物-1的序列為:5’-CCA GAG ATG GGA GTAACA CGT-3’; 特異性引物-2的序列為:5’-CTC CTC TGTTGC GAATAC TTC TAAAT-3’; 特異性TaqMan探針的序列為:5’-FAM-CGG ACC TTG TGC AAC TCT CCA CCTCC-TAMARA-3’。
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摘要
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已用于WSSV診斷的FQ-PCRe有耗時較長,存在非特異擴增產(chǎn)物或引物二聚體導(dǎo)致的假陽性結(jié)果缺陷。TaqMan PCR有更高的靈敏性和高精確性,但尚未應(yīng)用于WSSV的診斷。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,試劑盒中所裝的即檢測方法中所用反應(yīng)體系中有2×TaqMan Buffer液、特異性引物-1、特異性引物-2、TaqMan探針等等;PCR儀中的DNA操作過程是先作93℃下預(yù)變性2分鐘;再作93℃下變性5秒鐘、60℃下退火延伸30秒鐘、60℃下單點熒光檢測的循環(huán)40次。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,配備了所有無法從市場上購得所需的各種試劑;達到了高靈敏度、高重復(fù)性、高特異性的指標(biāo),另外還有所需待測樣本數(shù)量要求低和檢測所需時間短的特點。
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國際公布
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