| 公開(公告)號 | CN1936014A |
| 公開(公告)日 | 2007.03.28 |
| 申請(專利)號 | CN200510017149.1 |
| 申請日期 | 2005.09.21 |
| 專利名稱 | H5亞型高致病性禽流感病毒血凝素基因抗原蛋白 |
| 主分類號 | C12P21/02(2006.01)I |
| 分類號 | C12P21/02(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C07K14/11(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 金寧一 |
| 發(fā)明(設計)人 | 金寧一;徐一鳴;魯會軍;李 昌;韓 松;金擴世 |
| 地址 | 130062吉林省長春市青龍路1068號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 白冬冬 |
| 國省代碼 | 吉林;22 |
| 主權項 | 一種H5亞型高致病性禽流感病毒血凝素基因抗原蛋白的制備方法，其特征在于：首先將pUCM-TH5HA質粒由BamH I、EcoRV雙酶切，經補平后回收得到目的片段；pPIC9K質粒由EcoR I線性化，兩端分別補平、去磷后回收；將以上回收產物經T4連接酶連接后即獲得目的質粒pPIC9K-H5HA；再用SalI線性化pPIC9K-H5HA重組質粒，線性化后將其電轉化至GS115感受態(tài)中，再在MD平板中培養(yǎng)，而后挑取單個菌落于YPD培養(yǎng)基中復蘇，提重組體基因組進行PCR鑒定，篩選出的陽性菌株于BMGY培養(yǎng)基中搖菌，離心后轉至BMMY培養(yǎng)基中開始甲醇誘導，產物離心后取上清，加入飽和硫酸銨沉淀蛋白，收集蛋白進行進一步純化即得到H5HA抗原蛋白。 |
| 摘要 | 一種H5亞型高致病性禽流感病毒血凝素基因抗原蛋白，屬于生物技術領域，特別是涉及一種H5亞型禽流感病毒基因抗原蛋白。本發(fā)明提供一種能有效檢測致病致死率極高的禽流感H5亞型的HA抗體的H5亞型高致病性禽流感病毒血凝素基因抗原蛋白。本發(fā)明首先將pUCM-TH5HA質粒由BamH I、EcoRV雙酶切，得到的pPIC9K質粒由EcoR I線性化，再經T4連接酶連接獲得質粒pPIC9K-H5HA；用Sal I線性化pPIC9K-H5HA重組質粒，經過一系列工作后即得到H5HA抗原蛋白。本發(fā)明表達量高、特異性強、易于純化、具有完整的空間構象等特點完全符合ELISA快速檢測試劑盒的鑒定要求。 |
| 國際公布 |
