方法名稱(chēng): |
燈盞細(xì)辛--燈盞乙素含量測(cè)定--HPLC法 |
應(yīng)用范圍: |
測(cè)定燈盞細(xì)辛全草、根、莖、葉和花中中燈盞乙素的含量 |
方法原理: |
燈盞細(xì)辛經(jīng)水回流提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在286nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 島津LC - 6A 高效液相色譜儀(LC-6A泵,CTO-6A柱溫箱,SPD-6AV檢測(cè)器,SCL-6A系統(tǒng)控制器);LC2000色譜工作站(中科院成都分院提供); 色譜條件 色譜柱:天津凱德科學(xué)儀器有限公司Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相:乙腈-水-磷酸(18∶82∶0.2);流速:0.8mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):286nm;柱溫:45℃。 |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取干燥的燈盞乙素對(duì)照品適量,在濃度范圍為0.0132mg/mL~0.0396mg/mL以無(wú)水乙醇溶解并稀釋成兩份對(duì)照品溶液,即得。 供試品溶液的制備 分別取燈盞細(xì)辛全草、花、葉、莖和根各約0.5g精密稱(chēng)定,各以水50mL、40mL分別回流提取2次,每次1h,回流液轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中并以水稀釋至刻度。各取5mL,置25mL量瓶中以水稀釋至刻度,搖勻,即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液20μl,按上述色譜條件測(cè)定,外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算樣品中燈盞乙素的含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
楊文宇,張藝,段俊國(guó).高效液相色譜法測(cè)定燈盞細(xì)辛中燈盞乙素的含量.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).2001,24(3):37-38,41 |