方法名稱： |
曼地亞紅豆杉枝葉—紫杉醇的含量測(cè)定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于曼地亞紅豆杉枝葉中紫杉醇的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品粉末用超聲提取、濃縮、萃取等一系列處理后，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
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儀器設(shè)備 BT8100型泵；K-2501型紫外檢測(cè)器；N 2000雙通道色譜工作站。 | 色譜條件 色譜柱：phenomenex C18 ( 250mm×4.60mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇-水 (65∶35) ；流速：0.7mL /min；檢測(cè)波長(zhǎng)：227nm；柱溫：25℃。 |
試樣制備： |
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對(duì)照品溶液的制備 精密稱取紫杉醇對(duì)照品5.1mg，以甲醇溶解并定溶于10mL容量瓶中，制成5.0μg/mL的紫杉醇對(duì)照品儲(chǔ)備液。分別吸取 0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.00mL對(duì)照品儲(chǔ)備液，以甲醇定溶于5mL容量瓶中，制成濃度分別為10.2，20.4，40.8，61.2，81.6，102μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液，供繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)使用。 | 供試品溶液的制備 精密稱取 5.0000g曼地亞紅豆杉干枝葉粉末，加入100mL無水乙醇，冷浸過夜，超聲處理40min，靜置過濾，濾渣再以100 mL無水乙醇超聲30min，靜置過濾，合并濾液，于45℃ 真空濃縮至 18mL左右，加入2mL蒸餾水，以50mL正己烷萃取，再以25mL正己烷萃取2次。乙醇相于45℃真空濃縮至無醇，濃縮物以50mL氯仿充分溶解，加入50mL1 mol /L碳酸鉀溶液 (含5%氯化鈉 )攪拌20min，靜置分層，氯仿相再以25mL該碳酸鉀溶液洗滌2次。氯仿相轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶，并以氯仿定容，作供試品溶液。 |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各6μL，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
王志剛，周春山，顏家良等.HPLC 法測(cè)定曼地亞紅豆杉枝葉中紫杉醇的含量.應(yīng)用化工.2007，36（1)：84～86 |
